[发明专利]一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法

说明书

本发明提供了一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法，包括如下步骤：S1、制备百菌清分子印迹聚合物；S2、将所述百菌清分子印迹聚合物与硅藻土混合装柱制得百菌清分子印迹固相萃取柱；S3、将制得的百菌清分子印迹固相萃取柱用于待测样品处理，得洗脱液；S4、对步骤S3处理所得洗脱液，用色谱法检测洗脱液中的百菌清及其氧化还原产物含量。本发明利用百菌清为模板分子制备百菌清分子印迹聚合物，并将聚合物装填于固相萃取柱中制成萃取柱，对蔬菜与水体样品中的百菌清及其降解产物进行富集，净化，结合色谱法检测，确立一种高效、简单的方法；本发明特异性更高、灵敏度更好、检测速度更快。

技术领域

本发明涉及分子印迹聚合物制备领域，尤其涉及一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法。

背景技术

百菌清(chlorothalonil)化学名称为四氯间苯二腈，是一种非内吸性、广谱、高效的保护性杀菌剂，对多种作物的真菌病害具有防治作用。其杀菌机理是与真菌细胞中的磷酸甘油醛脱氢酶发生作用，结合脱氢酶体中含有半胱氨酸的蛋白质，使脱氢酶丧失活性，破坏真菌细胞的新陈代谢，从而导致真菌的死亡。

百菌清从生产开始，至今在世界农业生产中的使用已经超过50年，由于广泛和长期使用，在农作物和自然生态环境中都检测到百菌清的残留，同时百菌清在自然界中存在氧化降解与还原降解，其母体和降解产物对环境和食品安全均具有潜在威胁。百菌清对人和哺乳动物低毒，会引起皮肤炎症、眼睛不适和胃肠刺激等症状，对鱼、贝类等水生生物高毒，美国国家环境保护总署已经将其列为可能使人类致癌的物质之一。我国2012年修订的《生活饮用水卫生标准》首次将百菌清列入了监测范围。目前，关于农作物和自然生态环境中百菌清的检测方法有很多，但普遍存在以下缺陷：特异性较低、灵敏度差、检测时间长。

分子印迹技术(Molecular Imprinting Techniqe，MIT)是近年来出现的制备具有识别功能的聚合物材料的新技术，可获得在空间结构和结合位点上与某一分子完全匹配的分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers，MIPs)。分子印迹识别的高选择性来源于印迹聚合物基体中大量在大小、形状及功能基等方面与目标分子相匹配的结合位点。

据此，目前急需设计出一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法，并将其应用到农作物与自然生态环境中百菌清的检测中来，以提高检测的特异性、增加检测的灵敏度、缩短检测的时间。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法，可以快速检测待测物中的百菌清及其氧化还原产物，可提高检测的特异性、增加检测的灵敏度、缩短检测的时间。

本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：

一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法，其特点在于，包括以下步骤：

S1、制备百菌清分子印迹聚合物；

S2、将所述百菌清分子印迹聚合物与硅藻土混合装柱制得百菌清分子印迹固相萃取柱；

S3、将制得的百菌清分子印迹固相萃取柱用于待测样品处理，得洗脱液；

S4、对步骤S3处理所得洗脱液，用色谱法检测洗脱液中的百菌清及其氧化还原产物含量。

进一步，所述S3具体步骤如下：

S31、获得待测样品提取液；

S32、活化百菌清分子印迹固相萃取柱；

S33、将待测提取液过柱上样；

S34、对分子印迹固相萃取柱淋洗除杂，然后丙酮洗脱；得洗脱液。

进一步，所述百菌清及其氧化还原产物包括4-羟基百菌清、5-氯1，3-间苯二腈、2，5-二氯-1，3-间苯二腈、2，4，5-三氯-1，3-间苯二腈。