[发明专利]一种免疫细胞无血清冻存液及冻存方法

权利要求书

1.一种免疫细胞无血清冻存液，其特征在于，包括基础培养基和细胞冻存保护剂，所述细胞冻存保护剂由以下原料组成：聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯醚-10、皂荚多糖、羧甲基纤维素钠、聚甘油脂肪酸酯、竹叶黄酮；

所述免疫细胞无血清冻存液中细胞冻存保护剂的体积分数为：5-10％，以冻存液的终体积计，所述细胞保护剂中各组分的含量为：聚乙二醇3.5-5.0mg/mL、壬基酚聚氧乙烯醚-10 1.5-3.0mg/mL、皂荚多糖8.5-10.0μg/mL、羧甲基纤维素钠9.0-12.0μg/mL、聚甘油脂肪酸酯15.0-18.0μg/mL、竹叶黄酮35.0-40.0μg/mL。

2.根据权利要求1所述免疫细胞无血清冻存液，其特征在于，所述免疫细胞无血清冻存液中细胞冻存保护剂的体积分数为：8％，以冻存液的终体积计，所述细胞保护剂中各组分的含量为：聚乙二醇4.0mg/mL、壬基酚聚氧乙烯醚-102.0mg/mL、皂荚多糖8.5μg/mL、羧甲基纤维素钠10.5μg/mL、聚甘油脂肪酸酯16.0μg/mL、竹叶黄酮38.0μg/mL。

3.根据权利要求1所述免疫细胞无血清冻存液，其特征在于，所述免疫细胞为NK细胞。

4.根据权利要求3所述免疫细胞无血清冻存液，其特征在于，所述基础培养基为无血清RPMI 1640培养基。

5.一种免疫细胞的冻存方法，其特征在于，采用权利要求1至4任一项所述无血清冻存液冻存。

6.根据权利要求5所述免疫细胞的冻存方法，其特征在于，包括以下步骤：取待冻存的免疫细胞和权利要求1至5任一项所述的冻存液混合得到细胞悬液，将细胞悬液置于无菌冻存管中程序降温至-80℃，冻存12-24h，然后放入液氮中冻存。

7.根据权利要求6所述免疫细胞的冻存方法，其特征在于，所述细胞悬液中细胞的浓度为5×10⁶-1×10⁷个/mL。