[发明专利]一种保元汤制剂指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用UPLC-DAD-ELSD法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液和混合对照品溶液的配制：

取保元汤制剂制成供试品溶液；

取人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、甘草苷、甘草酸单铵盐、芹糖异甘草苷、异甘草苷和肉桂酸对照品，用溶剂配制成混合对照品溶液；

(2)对所述混合对照品溶液和供试品溶液进行检测，色谱条件为：

色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱，所述色谱柱的规格为100*4.6mm，填料直径为2.7μm；

检测器：DAD检测器串联ELSD检测器；

检测波长：258-262nm；

流动相A：乙腈，流动相B：醋酸铵缓冲溶液；

洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：

0-5min，5％流动相A，95％流动相B；

5-6min，5％→7％流动相A，95％→93％流动相B；

6-16min，7％→23.5％流动相A，93％→76.5％流动相B；

16-24min，23.5％流动相A，76.5％流动相B；

24-26min，23.5％→26％流动相A，76.5％→74％流动相B；

26-30min，26％→32％流动相A，74％→68％流动相B；

30-37.5min，32％→52％流动相A，68％→48％流动相B；

37.5-40min，52％→90％流动相A，48％→10％流动相B；

40-44min，90％流动相A，10％流动相B；

44-46min，90％→50％流动相A，10％→40％流动相B。

2.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，ELSD检测器的条件为：雾化器温度为38-42℃，漂移管温度为58-62℃，载气流速为1.5-1.7L/min。

3.如权利要求2所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，ELSD检测器的条件为：雾化器温度为40℃，漂移管温度为60℃，载气流速为1.6L/min。

4.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述醋酸铵缓冲溶液的浓度为0.8-1.2mmol/L，pH为4.3-4.7，流速为0.4-0.6mL/min，柱温为25-35℃。

5.如权利要求1或4所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述醋酸铵缓冲溶液的浓度为1.0mmol/L，pH为4.5，流速为0.5mL/min，柱温为30℃，进样体积为5μL。

6.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，检测波长为260nm。

7.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述色谱柱为Agilent Proshell 120EC-C18。

8.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，所述保元汤制剂包括保元汤液体制剂和保元汤固体制剂，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法包括如下步骤：

精密量取所述保元汤液体制剂或保元汤固体制剂的水溶液，加入无水乙醇，涡旋，离心，取上清液蒸干后，甲醇稀释定容，过滤，得供试品溶液。

9.如权利要求1所述的保元汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述混合对照品溶液中人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁的浓度分别为200μg·mL^-1；毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草酸单铵盐、肉桂酸、芒柄花苷、芒柄花素的浓度分别为250μg·mL^-1；异甘草苷的浓度分别为100μg·mL^-1。