[发明专利]多通道成像定量荧光免疫方法在审
申请号: | 202010327942.6 | 申请日: | 2020-04-23 |
公开(公告)号: | CN111521776A | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 范传华;孙京海 | 申请(专利权)人: | 安徽华培生物科技有限公司;浙江聚视信息技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/533;G01N33/558;G01N33/569 |
代理公司: | 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 | 代理人: | 郭卫芹 |
地址: | 230088 安徽省合肥市高*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通道 成像 定量 荧光 免疫 方法 | ||
本发明公开了多通道成像定量荧光免疫方法,包括有检测装置及其检测方法:检测装置包括:数字相机和试剂卡,数字相机下端转动安装有镜头,镜头底部安装有滤色片,镜头底部转动安装有镜片固定架,镜片固定架底部设置有若干组LED激光灯;检测方法的步骤如下:步骤一、荧光微球标记检测病毒抗体。步骤二、制备包被有抗检测病毒抗体的免疫层析试纸条。步骤三、制备洗脱液:将需要检测的人体鼻咽部拭子取样进行洗脱。步骤四、荧光免疫观察。本发明通过多组结果的共同展示,从而可以成倍的提升免疫检测的效率,可以为后续的疾病治疗留出更多的时间,该方法快速、简单、灵敏,成本低,易于推广。
技术领域
本发明涉及医疗荧光检测领域,特别涉及多通道成像定量荧光免疫方法。
背景技术
荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣。荧光检测的主要缺点在于只有少数化合物产生荧光。大多数的分子不发荧光,但含有可衍生的官能团用于合成能发荧光的衍生物。
现有的病毒检测方法效率低下,需要较长的时间来进行检测,从而对感染程度进行明确的判断,容易导致急性病症的加重,为此,我们提出多通道成像定量荧光免疫方法来解决上述问题。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明的目的在于。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
多通道成像定量荧光免疫方法,包括有检测装置及其检测方法:
检测装置包括:数字相机和试剂卡,所述数字相机为仪器级数字相机,所述数字相机下端转动安装有镜头,所述镜头底部安装有滤色片,通过滤色片对数字相机内发出的光进行过滤,所述镜头底部转动安装有镜片固定架,所述镜片固定架底部设置有若干组LED激光灯。
进一步的,所述试剂卡包括有侧视面板,所述侧视面板为塑料材质,所述侧视面板左侧设置有加样区,所述侧视面板右侧设置有检测区,所述检测区等距离分布有若干组测试条,所述加样区中部设置有若干组加样口,所述加样口用于将检测样本注入,每一组所述加样口对应有一组测试条。
进一步的,所述测试条设置有检测线和质控线,所述质控线为设计检测的标准反应结果,所述检测线为实际的样品检测结果,通过将质控线和检测线进行对比,可以直观的对测试结果进行观察,所述试剂卡可以实现同时对多组样品的同时检测,通过多组结果的共同展示,从而可以成倍的提升免疫检测的效率,可以为后续的疾病治疗留出更多的时间。
上述检查装置的检测方法的步骤如下:
步骤一、荧光微球标记检测病毒抗体
用活化液替换原有保存液:离心-去上清-活化液超声重悬;加入EDC进行活化,EDC是个可溶于水的碳二亚胺,在酰胺合成中用作羧基的活化试剂,也用于活化磷酸酯基团、蛋白质与核酸的交联和免疫偶连物的制取;称取一定量的EDC,溶解后加入微球溶液中旋转反应15min;去除未反应或残余的反应物:离心-去上清-超纯水超声重悬,重复3次;用反应液超声重悬微球,然后加入一定量的待标记蛋白,避光反应1~4小时;去除未偶联的蛋白:离心-去上清-超声重悬,重复1~2次,2~8℃保存备用。
步骤二、制备包被有抗检测病毒抗体的免疫层析试纸条
将检测病毒抗体及羊抗鼠二抗喷涂在试剂卡,具体是涂抹在加样区,37℃干燥箱干燥过夜。
步骤三、制备洗脱液
将需要检测的人体鼻咽部拭子取样进行洗脱,洗脱液包括:表面活性剂1mM~3mM;缓冲液10mM~1M;数字相机蛋白酶抑制剂3mM~10mM。
步骤四、荧光免疫观察
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