[发明专利]一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法

权利要求书

1.一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)血浆样品预处理：取血浆样品加入甲苯磺丁脲内标溶液，再加入乙腈溶液沉淀蛋白，涡旋离心后取上清液；

(2)采用高效液相色谱法-电喷雾离子化串联质谱(LC-MS/MS)法检测羟基酪醇在Beagle犬血浆中的浓度：所用的液相系统条件为：流动相为0.1％甲酸+5mM醋酸铵水和含0.1％甲酸的乙腈，梯度洗脱；质谱系统采用ESI源，负离子扫描模式；

该方法可对Beagle犬血浆样品中羟基酪醇进行定量检测，定量检测范围为1-2000ng/mL。

2.如权利要求1所述的一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于步骤(1)具体为：取100μL血浆样品置于1.5mL离心管中，加入10μL甲苯磺丁脲内标溶液及500μL乙腈溶液，涡旋2min，13000rpm(8℃)离心5min，取上清液作为待测液。

3.如权利要求1所述的一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于，LC-MS/MS法中液相系统条件为流动相：A相为0.1％甲酸+5mM醋酸铵水，B相为乙腈(含0.1％甲酸)，梯度洗脱：0～0.7min2％B，0.7～1.5min2％→90％B，1.6～2.5min2％B。

4.如权利要求1所述的一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于，LC-MS/MS法中液相系统条件为色谱柱为AccucoreaQC18色谱柱(2.1×50mm,2.6μm)；流速：0.5mL/min；柱温：40℃；进样室温度：15℃；进样量：1.0μL；进样时间：2.5min。

5.如权利要求1所述的一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于，LC-MS/MS法中质谱系统条件为：ABSCIEX5500三重四级杆串联质谱系统；离子源：ESI源；负离子模式；气帘气压力：-35psi；碰撞气：-8psi；离子化电压：-5500psi；离子源温度：550℃；喷雾气：-55psi；辅助加热气：-55psi；多重反应监测(MRM)模式。

6.如权利要求1所述的一种测定Beagle犬血浆中羟基酪醇的方法，其特征在于，羟基酪醇的m/z母离子→子离子为152.9→123.0，CE(碰撞能量)为-20V，DP(去簇电压)为-70V；甲苯磺丁脲的m/z母离子→子离子为269.1→170.1，CE为-50V，DP为-120V。