[发明专利]一种与鸭喙色性状相关的分子标记及其应用有效
| 申请号: | 202010312162.4 | 申请日: | 2020-04-20 |
| 公开(公告)号: | CN111334587B | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
| 发明(设计)人: | 刘贺贺;王继文;李亮;胡继伟 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司: | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人: | 胡琳梅 |
| 地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鸭喙色 性状 相关 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与鸭喙色性状相关的分子标记,其特征在于,所述分子标记为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的第23-26位的存在4bp缺失,存在所述4bp缺失的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示,如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的待测鸭个体为纯合黄色喙或杂合粉色喙,如SEQID NO.3所示的核苷酸序列的待测鸭个体为纯合粉色喙。
2.检测权利要求1所述分子标记的试剂在检测鸭喙色性状上的应用,如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的待测鸭个体为纯合黄色喙或杂合粉色喙,如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列的待测鸭个体为纯合粉色喙。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采集待测鸭个体的生物检材,提取待测鸭个体生物检材的基因组DNA;
(2)以所提取基因组DNA为模板,设计特异性扩增引物,再以步骤(1)的DNA为模板进行PCR扩增反应,获得PCR产物;
所述特异性扩增引物序列为:
上游引物(5’—3’):AAGTCTTATCCAGGTCCAGTCA;
下游引物(5’—3’):TTCTCTTCACGCTTCATTTGT;
(3)将步骤(2)得到的PCR产物电泳检测,然后测定基因序列,通过基因测序序列和峰图判定鸭喙色基因型;
判定鸭喙色对应的基因型的方法为:若PCR产物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1,待测鸭个体为纯合黄色喙或杂合粉色喙;若PCR产物的核苷酸序列为SEQ ID NO.3,待测鸭个体为纯合粉色喙。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(1)中,待测鸭个体生物检材的基因组DNA为鸭翅下静脉血样基因组DNA、皮肤样品基因组DNA或毛囊样品基因组DNA。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,反应体系为20 uL,包括上下游引物各0.5 uL、模板DNA 2 uL、dNTP 1.5 uL、taqDNA聚合酶1 uL、灭菌去离子水12.5 uL和10×solution buffer 2 uL。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,反应程序为:95℃变性 5 min;然后95℃变性30 s,55℃退火30s,72℃延伸50s,重复30个循环;最后12℃保存PCR产物。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤(3)中,利用1%浓度琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物,以DL2000作为DNA marker,Goldview I作为DNA染色剂。
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