[发明专利]一种治疗炎症性肠病及其他肠道疾病的口服MSCs充液胶囊

权利要求书

1.一种口服MSCs充液胶囊，其特征在于：包括三层结构的胶囊外壳和胶囊内容物，所述的胶囊外壳从内到外依次为中和胃酸的碳酸钙涂层、水溶性的明胶-羟丙基甲基纤维素凝胶和尤特奇S100包衣涂层，所述的胶囊内容物为混悬于海藻酸钠水凝胶培养液中的MSCs微球；其制备方法包括以下步骤：

(1)软胶囊外壳的制备：

碳酸钙溶液的配制：称取一定量的碳酸钙加入到双蒸水中分散，室温充分溶解；

明胶-羟丙基甲基纤维素凝胶的配制：分别称取一定量的明胶和羟丙基甲基纤维素，各自加入适量的双蒸水中，充分溶解；冷却至室温后将二者按照一定比例混合，充分搅拌直至均匀，放入冰箱冷藏，使其形成均一的混合凝胶；最终混合凝胶中明胶和羟丙基甲基纤维素的总浓度为0.5～10％，其中明胶浓度为0.05-5.0％；

尤特奇S100包衣液的配制：配制1-3％w/v的Eudragit S100的乙醇溶液；

(2)负载MSCs微球海藻酸钠水凝胶的制备：

将脐带间充质干细胞MSCs按一定密度均匀混合于海藻酸钠水凝胶中，再通过电喷微流控技术，在高电压的作用下将混合溶液喷射到氯化钙溶液中，获得包裹细胞的微凝胶液滴，微球大小可通过电压和流速进行调控；

(3)3D打印制备MSCs口服胶囊：

采集软胶囊的生物信息，输入计算机进行仿生建模，将预调量的三层软胶囊外壳与负载MSCs微球海藻酸钠水凝胶分别加载于准备好的挤压式3D打印料仓，设置打印参数后进行3D打印，打印成型的充液胶囊在仿生培养液中进行连续循环灌注培养，实现打印充液胶囊的预成熟。

2.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：步骤(1)中的碳酸钙室温溶解20min～40min，碳酸钙的浓度为5～30％w/v；明胶和羟丙基甲基纤维素各自加入适量的双蒸水中，反应温度80℃，搅拌时间1～4h充分溶解，二者的水溶液混合后放入4℃冰箱保持24小时以上，使形成均一的混合凝胶。

3.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：步骤(1)中，所述的羟丙基甲基纤维素的粘度为100～10000mPa.s；所述的Eudragit S100成分为甲基丙烯酸酯：甲基丙烯酸质量比＝1:2。

4.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：所述脐带间充质干细胞MSCs选自人脐带间充质干细胞第2～4代，接种细胞密度为10⁶个/ml。

5.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：电喷微流控技术的电喷参数设置为：电压为5kV，流速为30μl/min。

6.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：所述海藻酸钠水凝胶培养液使用F12/DMEM完全培养液配制而成。

7.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：所述微流控电喷技术制备的负载MSCs的海藻酸钠微球尺寸为143±5.2μm，且混悬于1％w/v的海藻酸钠水凝胶中。

8.根据权利要求1所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：步骤(3)通过repetierhostV1.0.5软件用3D打印机打印；仿生培养液为含有F12/DMEM+10％胎牛血清+抗生素的MSCs培养基。

9.权利要求1-8任一项所述的口服MSCs充液胶囊在作为治疗肠道疾病的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的口服MSCs充液胶囊，其特征在于：所述肠道疾病包括炎症性肠病。