[发明专利]靶向CD22的嵌合抗原受体及其制法和应用

说明书

本发明提供了一种靶向CD22的嵌合抗原受体及其制法和应用。具体地，本发明提供了一种靶向CD22的嵌合抗原受体，其包括前导序列、靶向CD22的scFv，铰链区，跨膜区，和胞内信号结构域。本发明提供编码该嵌合抗原受体的核酸分子和相应的表达载体、CAR‑T细胞及其应用。本发明的嵌合抗原受体靶向CD22阳性细胞，可以用于治疗CD22阳性B细胞白血病，包括一些抗CD19CAR‑T治疗后急性B细胞白血病复发的CD19阴性CD22阳性的患者。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，更具体地涉及一种靶向CD22的嵌合抗原受体及其制法和应用。

背景技术

血液系统的恶性肿瘤占人类恶性肿瘤约10％，95％血液系统的恶性肿瘤是B淋巴细胞来源。传统的化疗和放疗对治疗血液系统的恶性肿瘤起着重要作用，但是传统的癌症治疗方法遇到了瓶颈，手术、放化疗特异性差，副作用明显，易复发转移。有的病人虽疗效显著，但大部分都难以治愈。因此更为有效的新治疗方法一直是这一领域探索的热点。

癌症治疗的重点转向了最有希望的肿瘤免疫治疗方面。目前国外已有两个靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞疗法(CAR-T)产品获批上市，用于治疗儿童和年轻成年患者急性淋巴细胞白血病和成人二线或多线系统治疗的复发性或难治性大B细胞淋巴瘤。然而，anti-CD19 CAR-T治疗后，40％的患者在治疗1个月达到完全缓解之后又出现了复发，并且复发的患者中高于60％比例的患者出现了CD19阴性肿瘤细胞的逃逸。也有部分患者的肿瘤细胞CD19表达受限制，接受anti-CD19 CAR-T细胞治疗时常会出现无响应或者耐药性发生。因此，迫切需要筛选出靶向除CD19以外的B细胞白血病相关抗原的CAR-T结构，来治疗恶性淋巴瘤患者。

尽管抗CD19 CAR-T的疗效突出，但对于部分B细胞CD19抗原表达缺失的白血病患者却无效；部分患者因为抗CD19 CAR-T治疗后，CD19抗原表达降低甚至丢失，导致治疗效果不佳，容易复发，而仍有CD22的持续表达。

因此，本领域急需开发新的有效治疗肿瘤的新药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向CD22的嵌合抗原受体及其制法和应用。

具体地，本发明的目的在于提供一种靶向CD22抗原嵌合抗原受体的序列，及其修饰T细胞(CART-CD22)的制备方法和活性鉴定。本发明提供了一种用于治疗CD22阳性B细胞淋巴瘤的嵌合性抗原受体结构。

在本发明的第一方面，提供了一种嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体的抗原结合结构域(即，scFv)包括SEQ ID NO:1或3所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:2或4所示的抗体轻链可变区。

在另一优选例中，所述抗体重链可变区和抗体轻链可变区通过连接肽相连。

在另一优选例中，所述的抗原结合结构域的结构如下式I或II所示：

V_L-V_H (I)；V_H-V_L (II)

其中，V_H为抗体重链可变区；V_L为抗体轻链可变区；“-”为连接肽或肽键。

在另一优选例中，所述的抗原结合结构域的结构如式I所示。

在另一优选例中，所述V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，V_H的氨基酸序列如SEQID NO:2所示。(注：CAR-T22.13)

在另一优选例中，所述V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，V_H的氨基酸序列如SEQID NO:4所示。(注：CAR-T22.14)