[发明专利]同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法

说明书

本发明公开了同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法，包括如下步骤：步骤1、样品溶液提取，步骤2、溶液酶解，步骤3、净化获得待测溶液，步骤4、检测。本发明能使在一次的检测过程中就能同时检测利巴韦林和金刚烷胺的，在较短的时间内就能得到检测结果。

技术领域

本发明涉及动物源性食品检测技术领域，尤其是涉及同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法。

背景技术

抗病毒类药物原来是用以治疗人类流行性感冒的一类药物，但是在人饲养的畜禽上多次大规模流感的爆发，比如H1N5 禽流感等等，有极高的畜禽发病率和死亡率，造成了巨大的经济损失，为了降低畜禽的发病率，有养殖者便将抗病毒类药物添加到动物饲料中，以降低畜禽的发病率，甚至一些不法饲料商贩勾结养殖者为谋取不正当利益，也开始在饲料中添加大量的抗病毒类药物。然而非法使用抗病毒类药物会造成动物体内药物残留，加大病毒的耐药性及变异的可能性，甚至部分残留的抗病毒类药物，比如金刚烷胺会损伤人体的生殖系统，并造成不可恢复性的损伤，因此国家将抗病毒类药物列为禁用药物，2005年农业部发布560号公告，明文规定畜禽养殖业禁止使用利巴韦林、金刚烷胺类抗病毒药物，2006年美国FDA也明文规定禁止使用上述药物用于禽类饲养过程。

当前畜产品中残留的利巴韦林、金刚烷胺等抗病毒药物的检测采用是一次检测过程中只检测一个抗病毒药物的检测方法，如果要检测多种抗病毒药物，就需要制备多个样品，进行多次检测，其检测效率低，周期长，已经跟不上当前消费者需要在极短的时间内得到畜产品是否有抗病毒类药物残留的要求。

发明内容

本发明提供同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法，以解决在需要多个样品多次检测，其检测效率低，周期长的问题，能使在一次的检测过程中就能同时检测利巴韦林和金刚烷胺的，在较短的时间内就能得到检测结果。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法，包括如下步骤：

步骤1、样品溶液提取

称取一定质量的畜产品样品，置于离心管中，加入定量的一定配比的三氯乙酸和乙腈混合溶液，将离心管放置是在振荡器中震荡溶解一段时间，然后在放置在超声清洗机中超声溶解一段时间，再放置在高速离心机中进行离心，取出上清液至容量瓶中，再在离心管中加入定量的一定配比的三氯乙酸和乙腈混合溶液，重复操作提取，离心后合并上清液至容量瓶中，定容。

步骤2、溶液酶解

移取一定量的提取液置入离心管中，加入适量的乙酸铵溶液，混合均匀，再加入适量的酸性磷酸酯酶，混合均匀，置于烘箱中在一定温度下培养一段时间，取出后冷却至室温，用氨水调节PH值，混合均匀，放置在高速离心机上离心，取出上清液至容量瓶中备用。

步骤3、净化获得待测溶液

将容量瓶中的上清液转入经过活化的PBA/PCX复合固相萃取小柱中，依次用定量的一定浓度的乙腈-乙酸铵缓冲液和氨水甲醇淋洗，流出液作为废液处理，留置在固相萃取小柱的溶液用真空泵抽干并持续一定时间，然后用洗脱液洗脱到氮吹管中，在一定温度的水浴下氮气吹干，加入一定的乙腈水溶液溶解残渣，过滤有机滤膜，获得待测定溶液，

步骤4、检测

将待测溶液用液相色谱-质谱仪测定，获得样品中利巴韦林和金刚烷胺的含量。

本发明的有益效果是：

1、本发明的同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺残留的方法，与现有的检测手段相比，进行一次制备样品，就可同时检测畜产品中利巴韦林和金刚烷胺的残留含量，极大的节省了检测时间，提高了检测效率。