[发明专利]一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞、诱导试剂盒及应用

权利要求书

1.一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，通过如下步骤制备：

(1)分离并培养间充质干细胞；

(2)采用免疫因子诱导复合剂诱导培养的间充质干细胞，获得免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，

所述诱导复合剂包括IFN-Υ和TNF-α，所述IFN-Υ的浓度为5-20ng/ml，所述TNF-α的浓度为0-20ng/ml。

2.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，所述IFN-Υ的浓度为20ng/ml，所述TNF-α的浓度为5-20ng/ml。

3.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，所述诱导复合剂还包括白蛋白赋形剂。

4.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，在通过步骤(1)获得的3-8代间充质干细胞增殖培养至70-80％细胞融合度时，加入所述诱导复合剂。

5.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，所述步骤(2)采用免疫因子诱导复合剂诱导间充质干细胞的诱导时间为18～24h，然后撤出所述诱导复合剂继续培养诱导后的间充质干细胞至少24h。

6.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人脂肪、牙髓、骨髓、脐带、胎盘或脐带血。

7.根据权利要求1所述的一种免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞，其特征在于，所述步骤(1)分离并培养间充质干细胞包括：采集样本组织进行洗涤；分离组织；将分离出的组织块置于生理盐水中洗涤，并剪碎、称重，转入离心管中离心，弃上清液；向离心管中加入MSCs培养基，培养一段时间；当原代细胞生长至细胞密度80％时，消化解离并进行传代培养，获得间充质干细胞。

8.一种如权利要求1-7任一项所述的免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞的体外培养诱导试剂盒，其特征在于，包括MSCs的基础培养基，MSCs增殖培养添加剂，免疫因子诱导复合剂。

9.一种如权利要求1-7任一项所述的免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞的质量评估方法，将所述间充质干细胞内的PD-L1受体的阳性表达率作为所述间充质干细胞的质量控制指标。

10.一种如权利要求9所述的间充质干细胞的质量评估方法，通过流式细胞检测法检测间充质干细胞的PD-L1受体的阳性表达率。

11.一种如权利要求9所述的间充质干细胞的质量评估方法，所述PD-L1受体的阳性表达率至少为30％。

12.一种如权利要求1-7任一项所述的免疫抑制或抗炎功能增强型PD-L1阳性间充质干细胞在制备预防或治疗自身免疫性疾病和/或炎性相关疾病的药物中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病包括类风湿性关节炎、硬皮病、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎、重症肌无力和多发性溃疡性结肠炎等中的至少一种；

所述炎性相关疾病包括脓毒症、退行性关节炎和新生儿支气管肺发育不良性肺炎等中的至少一种。