[发明专利]一种单链快速建库方法及建库仪器

权利要求书

1.一种单链快速建库方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤S10：提供DNA样本经多聚核苷酸激酶处理得到DNA混合物；

步骤S20：在一个反应试管中将所述DNA混合物的3’端连接第一接头，将所述DNA混合物的5’连接第二接头；具体地，通过退火配对形成第一接头和第二接头；将一个反应试管的所述DNA混合物加入T4 DNA连接酶和第一接头，并加入等量第二接头；加入连接缓冲液，加水补足体积后进行连接酶反应；等待所述连接酶反应完成，实现所述DNA混合物连接第一接头和第二接头；

步骤S30：使用外切酶对所述第一接头和第二接头进行反应处理，以得到处理后的第一产物；所述外切酶包括核酸外切酶ExonucleaseIII；

步骤S40：对所述第一产物按照PCR进行扩增，以得到第二产物；

步骤S50：所述第二产物经过使用磁珠进行纯化处理后去除所述磁珠，以得到文库。

2.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，所述DNA样本包括cfDNA和打断至指定碱基对长度的gDNA。

3.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，所述T4DNA连接酶的终浓度为0.1U/μL～500U/μL。

4.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，所述第一接头和第二接头的浓度均为0.1μM-500μM。

5.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，所述ExonucleaseIII的数量为0.01-1000U。

6.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，使用外切酶对所述第一接头和第二接头进行反应时加入Exonuclease III缓冲试剂。

7.根据权利要求1所述的单链快速建库方法，其特征在于，所述单链快速建库方法还包括在加入外切酶反应前先进行纯化处理。