[发明专利]一种二元猪基因鉴定方法

权利要求书

1.一种二元猪基因鉴定方法，其特征在于，以待测猪的MC1R基因的第一等位基因和第二等位基因作为模板，用第一正向引物、第二正向引物和通用反向引物进行PCR扩增，采用荧光检测仪器对扩增产物进行荧光检测，根据扩增产物的荧光类型对待测猪的MC1R基因进行SNP分型。

2.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述第一正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述第一正向引物序列包括特异荧光序列FAM，所述特异荧光序列FAM结合FAM荧光标记物，所述特异荧光序列FAM的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

3.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述第二正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述第二正向引物序列包括特异荧光序列HEX，所述特异荧光序列HEX结合HEX荧光标记物，所述特异荧光序列HEX的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。

4.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述通用反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

5.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述第一正向引物与第一等位基因特异匹配，所述第一等位基因为二元猪的MC1R基因。

6.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述第二正向引物与第二等位基因特异匹配，所述第二等位基因为非二元猪MC1R基因。

7.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述荧光检测仪器为酶标仪。

8.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，所述扩增产物的荧光类型包括FAM荧光和HEX荧光；

若以所述第一正向引物和通用反向引物进行PCR扩增时，所述扩增产物的荧光类型为FAM荧光；

若以所述第二正向引物和通用反向引物进行PCR扩增时，所述扩增产物的荧光类型为HEX荧光。

9.根据权利要求1所述的二元猪基因鉴定方法，其特征在于，当所述扩增产物只检测到FAM荧光时，所述待测猪的MC1R基因为二元猪MC1R基因纯合子，所述待测猪为纯二元猪；

当所述扩增产物只检测到HEX荧光时，所述待测猪的MC1R基因为非二元猪MA1R基因纯合子，所述待测猪为非二元猪；

当所述扩增产物同时检测到FAM荧光和HEX荧光时，所述待测猪的MC1R基因为二元猪MC1R基因杂合子，所述待测猪为非纯二元猪。