[发明专利]预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料，其特征在于，包括与织物结合的水凝胶，水凝胶表面和内部分布有促成纤维细胞迁移的多肽；所述水凝胶由醛基化葡聚糖、双酰肼与部分烷基化的葡聚糖分别溶于PBS溶液后，混合交联制得；所述部分烷基化的葡聚糖的制备方法为：在室温下，将醛基化葡聚糖溶于去离子水中，将脂肪胺溶于乙醇溶液中，两者混合反应1-4小时；在混合液中加入过量的氰基硼氢化钠，室温下搅拌12-24小时，利用乙醇沉淀部分烷基化葡聚糖；再将反应产物透析，冻干，保存。

2.如权利要求1所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料，其特征在于，所述的多肽含KGRT序列，衍生自红系分化调节因子1，即Erdr1的功能区，与Erdr1共享三个氨基酸，其中Erdr1可调节应激相关反应。

3.如权利要求1所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料，其特征在于，所述氰基硼氢化钠与醛基化葡聚糖的摩尔比为3：1。

4.权利要求1或2所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)：将不同分子量的葡聚糖经氧化剂选择性氧化成醛基化葡聚糖；

步骤2)：醛基化葡聚糖与脂肪胺反应得到部分烷基化的葡聚糖；

步骤3)：多肽的固相制备：

步骤3.1)：将二氯三苯甲基氯树脂加入到溶剂中浸泡，使之充分溶胀，然后排出溶剂；

步骤3.2)：将氨基酸用溶剂溶解，然后将该溶液转入到已处理的二氯三苯甲基氯树脂中，再加入催化剂，在室温下，氨基酸与树脂相互作用，使其充分固定在树脂上；

步骤3.3)：用溶剂洗涤树脂，加入哌啶溶液到树脂中反应，脱去保护基；

步骤3.4)：用溶剂洗涤树脂，用茚三酮检验保护是否完全；

步骤3.5)：将氨基酸、HBTU、HOBt溶于溶剂中，将该溶液转入到步骤3.4)所得的树脂中，再加入催化剂，在室温下反应；用溶剂洗涤树脂，用茚三酮检验氨基是否反应完全，若无色，则进行下一步操作；若显蓝色，则重复本步骤直至检验为无色，即合成多肽；

步骤3.6)：用二氯甲烷洗涤树脂，充分洗干，然后干燥；

步骤3.7)：用三氟乙酸与步骤3.6)得到的产物反应，切落多肽；

步骤3.8)：收集滤液和洗液，旋蒸浓缩，用无水乙醚沉淀，静置；沉淀充分后，抽滤，洗涤，干燥；

步骤4)：将步骤1)得到的醛基化葡聚糖，己二酸二酰肼与步骤2)得到的部分烷基化的葡聚糖分别溶于PBS缓冲液，将步骤3)制得的多肽加入醛基化葡聚糖溶液中，预载固相合成的多肽，然后将三种溶液混合，制备预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶；

步骤5)：将预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶与织物结合制成敷料。

5.如权利要求4所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中葡聚糖的数均分子量为5000-100000；氧化剂为KMnO₄，NaIO₄或KIO₄。

6.如权利要求4所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中脂肪胺的碳原子数在6-15个。

7.如权利要求4所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中的溶剂为DMF，哌啶溶液中的溶剂同样为DMF；催化剂为二异丙基乙胺。

8.如权利要求4所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中醛基化葡聚糖、己二酸二酰肼、部分烷基化的葡聚糖溶液的质量比为(2-4):1:1。

9.如权利要求4所述的预载多肽的可注射自修复抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中多肽与醛基化葡聚糖溶液的比例为1μg：200μL。