[发明专利]一种食品中非法添加环己基去甲他达拉非的鉴定方法

说明书

本发明公开了一种食品中非法添加环己基去甲他达拉非的鉴定方法，属于药物化学领域。所述的鉴定方法，包括以下步骤：(1)制备UPLC‑Q‑Orbitrap HRMS超高效液相色谱‑四级杆/静电轨道阱高分辨质谱仪的供试品溶液和HPLC高效液相色谱仪的供试品溶液；(2)取供试品进行化合物分离纯化，得到纯化物；(3)取所得纯化物，制备NMR核磁共振仪供试品；(4)对供试品进行检测，包括使用LC‑20AR制备液相色谱仪、PAD二极管阵列检测器，对得到的一级二级质谱图、特征吸收光谱图进行分析，通过核磁共振仪进行结构解析得到环己基去甲他达拉非结构式，最后鉴定出非法添加的环己基去甲他达拉非。使用本发明的方法，可有效鉴定出食品中非法添加的环己基去甲他达拉非。

技术领域

本发明涉及药物化学领域，特别是涉及一种食品中非法添加环己基去甲他达拉非的鉴定方法。

背景技术

我国法律法规严厉禁止在食品中添加食品添加剂以外的化学物质，对此类非法添加行为向来严厉打击。在高压打击之下，不法分子投机取巧，转而添加现行标准检测范围之外的其他类似物。在进行抗疲劳类食品非法添加筛查时，采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道离子阱质谱筛查技术发现一个未知的他达拉非衍生物，他达拉非是一种选择性可逆磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂，用于治疗男性勃起功能障碍的处方药，必须在医生指导下服用。该衍生物与已经批准上市的他达拉非具有相同的母核，结构差异小。该方法的建立为制备和鉴定食品(含保健食品)中新型那非类化合物打开了新的思路。

食品、保健食品中的新型那非类药物的检测以液相色谱-质谱/质谱法检测方法为主。国家市场监督管理总局颁布的补充检验方法《BJS201805食品中那非类物质的测定》包含90种那非类物质，包括了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法和超高效液相色谱-串联高分辨质谱法两种方法，是国际同类标准中覆盖化合物最多的标准，并为未知衍生物的检测和鉴定提供参考。

对于新型那非类物质的鉴定需要采用多种鉴定手段联合开展。冯睿等(一种新型他达拉非衍生物的分离和鉴定[J].食品安全质量检测学报,2016(7):2710-2714)通过高效液相制备该化合物，并通过紫外光谱、精确分子量及串联质谱的信息推测该化合物的结构，经核磁共振及文献比对确证其结构为2-羟乙基去甲基他达拉非。夏佳等(保健品中一种新型他达拉非相关化合物的结构鉴定[J].中国现代应用药学,2017(08):99-102)通过高效液相色谱-二极管阵列检测器联用筛查，发现一种补肾壮阳类保健食品中添加了一种他达拉非类化合物。经过制备液相提纯后,得到目标化合物,用高效液相色谱-四级杆/飞行时间质谱获得相对分子质量和结构碎片。结合核磁共振氢谱和碳谱及相关文献数据,鉴定出该化合物的结构为二乙氨基前他达拉非。本发明所述物质是一种新型他达拉非类衍生物，国内外均未见其鉴定和检测相关研究，缺乏相关数据。但因其大部分官能团与他达拉非相似，可以参考同类其他新型衍生物鉴定研究的方法和思路。

超高效液相色谱-四级杆静电场轨道离子阱高分辨质谱被广泛应用于食品保健食品中非法添加的确证检测，通过高分辨质谱确定了该新型他达拉非衍生物的精确分子量和分子式；利用超高效液相色谱-二极管阵列分析，得到了该衍生物的色谱和特征吸收光谱；采用高效液相色谱-紫外收集制备系统，收集到足量的目标物质，用核磁共振得到碳谱和氢谱数据，结合文献分析，最终鉴定该化合物的结构。

以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。

发明内容

本发明目的在于提供一种食品中非法添加环己基去甲他达拉非的鉴定方法，以解决现有技术存在的缺乏商业标准品的新型他达拉非衍生物的制备和鉴定方法的技术问题。

为此，本发明提出以下方案：

一种食品中非法添加环己基去甲他达拉非的鉴定方法，包括以下步骤：