[发明专利]一种新型冠状病毒检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明实施例涉及临床体外检测领域，具体涉及一种新型冠状病毒检测试剂盒及其制备方法。本发明实施例提供的新型冠状病毒检测试剂盒，包括：辣根过氧化物酶标记的抗人IgA抗体；和，偶联有新型冠状病毒抗原的磁微粒。本发明实施例中提供的新型冠状病毒检测试剂盒，首次在酶标工作液中加入了IgA‑HRP来检测人血清或血浆中新型冠状病毒IgA抗体从而检测新型冠状病毒感染，检测灵敏度高，特异性好。通过对部分临床已确诊为新型冠状病毒感染阳性(但PCR核酸检测阴性的)患者血样进行复检，该试剂盒能检出相当部分(IgA)阳性，提示可与核酸检测形成互补，且灵敏度明显高于新型冠状病毒IgM抗体检测试剂盒，特异性明显好于新型冠状病毒IgG抗体检测试剂盒。

技术领域

本发明涉及临床体外检测领域，具体涉及一种新型冠状病毒检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)属于β冠状病毒属，其基因组为一长约29kb的正单链RNA。其基因组可编码至少四种病毒结构蛋白，分别为刺突蛋白(Spike，S)、膜蛋白(Membrane，M)，包膜蛋白(Envelop，E)以及核蛋白(Nucleocapsid，N)。

化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)兴起于上世纪70年代中期，发展至今已经成为一种成熟先进的超微量活性物质检测技术，应用范围十分广泛。该技术近10年发展迅猛，是目前推广应用最快的免疫分析方法，也是目前最先进的标记免疫测定技术，灵敏度和精确度比酶免法、荧光法高几个数量级。

在化学发光免疫分析中包含两个部分，即免疫反应技术和化学发光技术。其基本原理是免疫反应中的酶作用于发光底物，使之发生化学反应并释放出大量的能量，产生激发态的中间体。这种激发态中间体回到稳定的基态时，可同时发射出光子。利用发光信号测量仪器即可测量出光量子产额，该光量子产额与样品中的待测物质的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。化学发光免疫分析技术常采用双抗体夹心法、竞争法及间接法等反应模式。

磁微粒是指磁性纳米粒子与无机或有机分子结合形成的可均匀分散于一定基液中具有高度稳定性的胶态复合材料。由于磁微粒具有磁响应性，成本低、能耗少和无污染等特点，人们在磁微粒表面或通过磁微粒表面的功能基团(如氨基、羧基、巯基及环氧乙烷等)将酶、抗体、寡核苷酸等生物活性物质进行固定，可进一步用于酶的固定化、靶向药物载体、细胞分选、免疫检测、蛋白与核酸的分离纯化及杂交检测等领域。

传统的免疫学检测多以酶标板为固相载体，而悬浮性磁微粒作为载体具有较高的比表面积，能够更为充分地与样品反应，加之外加磁场的灵活应用，较之酶标板载体具有更高的灵敏度、更快的检测速度和更好的重复性等优点，目前已被广泛应用于生物及医学检测等领域。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

发明目的

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种新型冠状病毒检测试剂盒及其制备方法。本发明实施例提供的新型冠状病毒检测试剂盒，采用间接法原理定性检测人血清或血浆中新型冠状病毒IgA抗体：用新型冠状病毒抗原标记磁微粒，加入待检样本，样本中的抗新型冠状病毒抗体与标记抗原反应，再与辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgA 抗体结合，通过免疫反应形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与待测样本中的新型冠状病毒IgA抗体的含量成正比。通过对部分临床已确诊为新型冠状病毒感染阳性，但PCR核酸检测阴性的患者的血样进行复检，该试剂盒能检出相当部分(IgA)阳性，提示可与核酸检测形成互补。

解决方案