[发明专利]交联或高分子量透明质酸类物质的微生物限度检测方法

权利要求书

1.一种交联或高分子量透明质酸类物质的微生物限度检测方法，其特征是：在低温弱酸条件下对待检的交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质进行酶解处理，以降低交联或高分子量透明质酸类物质溶液的粘度，然后将粘度降低的酶解液用于微生物限度检测；

所述交联透明质酸类物质为将透明质酸或透明质酸盐进行交联得到的物质，所述高分子量透明质酸类物质为透明质酸或透明质酸盐；

所述交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质的分子量在1000 KDa以上，交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质的0.1 wt%水溶液的粘度大于等于250 mPa·s；

所述酶为芽孢杆菌（Bacillus sp.）A50 CGMCC NO.5744发酵生产的透明质酸酶、牛睾丸透明质酸酶、水蛭透明质酸酶或硫酸软骨素酶；

所述低温弱酸条件指的是：酶解的温度为4℃-18℃，酶解的pH为4.5-5.5；

当10 wt%浓度的交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质溶液酶解至粘度小于等于10 mPa·s时，将所得酶解液用于微生物限度检测。

2.根据权利要求1所述的微生物限度检测方法，其特征是：当用芽孢杆菌（Bacillussp.）A50 CGMCC NO.5744发酵生产的透明质酸酶进行降解时，每g交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质加入10000 IU-300000 IU的透明质酸酶。

3.根据权利要求1所述的微生物限度检测方法，其特征是：酶解的温度为10℃-18℃。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的微生物限度检测方法，其特征是：通过无菌的缓冲液提供酶解时的弱酸条件，所述缓冲液的pH为4.5-5.5。

5.根据权利要求4所述的微生物限度检测方法，其特征是：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲液的浓度为5 mmol/L-200 mmol/L。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的微生物限度检测方法，其特征是：酶解体系中，交联透明质酸类物质或高分子量透明质酸类物质的浓度为0.05-0.15 g/mL。

7.根据权利要求1-3中任一项所述的微生物限度检测方法，其特征是：将酶解液用灭菌的生理盐水配成1:10的检液，然后进行微生物限度的检测。