[发明专利]一种RNA激活Cas14a酶附带切割效应的方法有效
| 申请号： | 202010242835.3 | 申请日： | 2020-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN111363763B | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 杨治庆;韦阳道;万逸 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京金蓄专利代理有限公司 11544 | 代理人： | 周世平 |
| 地址： | 570228 海南省*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 rna 激活 cas14a 附带 切割 效应 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：向含有单链引导RNA(sgRNA)-Cas14a复合体的溶液中加入靶链RNA，即可激活Cas14a的附带切割效应；
所述sgRNA的序列为TTCACTGATAAAGTGGAGAACCGCTTCACCAAAAGCTGTCCCTTAGGGGATTAGAACTTGAGTGAAGGTGGGCTGCTTGCATCAGCCTAATGTCGAGAAGTGCTTTCTTCGGAAAGTAACCCTCGAAACAAATTCATTTgaaaGAATGAAGGAATGCAAC+间隔序列；间隔序列为UACCUUACACCGCUUGCGAA；
靶链RNA为RNA1序列或者RNA2序列，其中：
RNA1序列：UUCGCAAGCGGUGUAAGGUA；
RNA2序列：AUGCGCAGGCGUGUUCGCAAGCGGUGUAAGGUAGCAGGCGUGUCG。
2.按权利要求1所述的RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：所述sgRNA-Cas14a复合体的制备方法为混合sgRNA和Cas14a酶，在0-60℃混合孵育0-300分钟。
3.按权利要求1所述的RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：所述Cas14a的浓度为0-100mM。
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