[发明专利]一种RNA检测方法

说明书

本发明属于分子生物技术领域，具体的说是一种RNA检测方法，包括用于移动RNA的移液枪；该方法中通过将移液枪的吸嘴与吸头通过锁紧杆连接，不仅有效的降低了吸头与吸嘴装卸时的不便与磨损，也能有效的降低手部与吸头直接接触导致RNA的交叉污染，从而有效的提高了RNA在检测时的便捷性与准确性；且该方法中通过在锁紧杆顶端与二号槽口内部分别设有一号磁铁与二号磁铁，使得密封囊在两磁铁的压力下更紧密的贴合在吸嘴与吸头之间，从而对两者之间的空间进行更有效的密封，从而大大提高了RNA检测时的准确性。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域，具体的说是一种RNA检测方法。

背景技术

RNA即为核糖核酸，存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子，一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成，医学或研究中常常需要对RNA进行检测。

如现有技术中叶出现了一些关于RNA检测的技术方案，如专利号为2015104666853的一项中国专利，一种肝癌中环状RNA-MET基因及其表达方法和荧光定量PCR检测方法，该方法通过设计能扩增环状RNA的特异性引物，PCR扩增出来MET基因的环状RNA，通过PCR产物克隆DNA测序的方法测定出来了环状RNA-MET的准确的环化位点；确定了MET基因客观存在一种由1214个核苷酸组成的环状RNA。本发明通过肝癌中环状RNA-MET基因的荧光定量PCR检测方法；能够特异性检测肝癌细胞和肝癌临床组织标本中的环状RNA-MET的存在及表达性差异；本发明可以为肝癌的早期临床诊断提供一种理想的基因检测方法；

当使用移液枪对RNA所在的溶液进行移动时，需要用力的按住吸头向吸嘴内部挤压使其与吸嘴紧密装配，此操作一方面使得吸头与吸嘴在反复用力的挤压装配中造成磨损与破坏，一方面使用双手接触按压吸头时容易造成皮肤上的RNA酶对吸头造成污染，从而使得RNA所在的溶液在移动的过程中受到交叉污染，且此种方法下的吸头与吸嘴不管在装配与卸下时都比较费时费力，从而增加了实验者的操作难度，影响RNA检测的顺利进行。

鉴于此，本发明提供了一种RNA检测方法，通过改变移液枪吸头与吸嘴的连接方式，有效的提高了RNA在检测时的便捷性与准确性。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种RNA检测方法，通过改变移液枪吸头与吸嘴的连接方式，有效的提高了RNA在检测时的便捷性与准确性。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种RNA检测方法，该方法包括以下步骤：

S1：研钵加液氮3次，加入样品，研磨至粉末，加入Trizol，且使每100mg组织加1ml的Trizol，充分研磨后放在室温下解冻，解冻过程中利用暖风机加速接解冻；通过暖风机吹热风一方面可以加速空气的流动，从而在不破坏本身样品性质的情况下，提高解冻的速度，另一方面利用热风也实现了热传递，进一步加速了解冻速度；

S2：在S1中样品解冻后，将样品放在2-50℃环境下离心10min，使得不溶性物质沉淀，将RNA上清液通过移液枪的吸嘴将RNA上清液吸入之后，再次沿同一方向甩动10-15次，再次用移液枪移入至1.5ml离心管中；在15-30℃下放置5min，使核蛋白复合物完全解离，加入0.2m1氯仿，振荡15sec，室温温浴2-3min，2-8℃离心15min，使得RNA全部溶解于上层水相中，用移液枪把水相移入另一1.5m1离心管中；

S3：在S2中对核蛋白复合物完全解离后，向水相中加0.5m1氯仿，振荡15sec，室温下温浴2-3min；2-8℃下离心15min，把水相用移液枪转入至1.5m1离心管中，并加入0.5ml异丙醇，15-30℃温浴10min；2-8℃下离心10min，使得RNA沉积在离心管的底部及侧壁；