[发明专利]一种真菌荧光染色液及其制备方法

权利要求书

1.一种真菌荧光染色液，其特征在于，真菌荧光染色液由以下原料组成：

5-羟基荧光素、真菌引物ITS4、促溶剂、抗干扰荧光助剂肌醇六磷酸钾、稳定剂、渗透剂、背景染料、去离子水。

2.根据权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述促溶剂为氢氧化钠和氢氧化钾的混合物。

3.根据权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述稳定剂为山梨醇。

4.根据权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述渗透剂为二甲基乙酰胺。

5.根据权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述背景染料为染料溴百里酚蓝。

6.根据权利要求2所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述促溶剂中氢氧化钠和氢氧化钾的重量比为1:1。

7.根据权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于，所述真菌荧光染色液由以下重量份数的原料组成：5-羟基荧光素0.005份、真菌引物ITS40.03份、促溶剂氢氧化钠和氢氧化钾按重量比为1:1的比例混合的混合物11份、抗干扰荧光助剂肌醇六磷酸钾1份、稳定剂山梨醇20份、渗透剂二甲基乙酰胺0.5份、背景染料溴百里酚蓝2份、去离子水60份。

8.制备如权利要求1-7任一项所述真菌荧光染色液的方法，具体步骤如下：

(1)将5-羟基荧光素和真菌引物ITS4溶于1/2去离子水中，搅拌均匀后，缓慢加入促溶剂，轻轻搅拌充分溶解，然后置于37℃恒温摇床上，摇床转速为80-110转/min，时间为50-65min，获得溶液A；

(2)将抗干扰荧光助剂、稳定剂、渗透剂以及背景染料溶液溶于剩余去离子水中，搅拌均匀后，获得溶液B；

(3)将溶液A缓慢倒入溶液B中，搅拌均匀后即得真菌荧光染色液。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中摇床转速为100转/min，时间为60min。