[发明专利]一种修复呼吸系统损伤的干细胞条件培养上清液及其制剂

权利要求书

1.一种修复呼吸系统损伤的干细胞条件培养上清液，其特征在于，所述干细胞条件培养上清液通过以下步骤制备而成：取传达次数为5-8代的间充质干细胞，去除原培养基，加入与原培养基等量的条件培养基放置于培养箱中，在温度为37.0±0.5℃、CO2浓度为5.0±0.2％、饱和湿度的条件下培养24小时，所述条件培养基为含工作浓度为0.005-0.015M的HEPES缓冲盐溶液的无酚红DMEM培养基，收集上清液，离心15-25min，弃去沉淀，即得干细胞条件培养上清液。

2.如权利要求1所述的修复呼吸系统损伤的干细胞条件培养上清液，其特征在于，所述间充质干细胞传代及上清收获时的细胞密度均在90％以上。

3.一种由权利要求1或2所述的修复呼吸系统损伤的干细胞条件培养上清液和附加成分制成的鼻咽喷雾敷剂，所述附加成分主要包括人参与黄芪的混合提取物和生理盐水，所述干细胞条件培养上清液和所述人参与黄芪的混合提取物在生理盐水中的体积浓度分别为8％-10％、1％-4％。

4.如权利要求3所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述人参与黄芪的混合提取物的制备方法为：取黄芪和人参原料，清洗、干燥、粉碎，接入菌种液后摇床培养发酵45天，黄芪和人参的重量比为1-2:1-2，黄芪和人参的总重量与菌种液的重量比为1:1-2摇床培养的条件为：ph＝3-5、温度为35-40℃；发酵后在4800r/min条件下离心20min，取上清液，在100℃水浴下灭菌20-40min，即得人参与黄芪的混合提取物。

5.如权利要求3所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述附加成分还包括吐温-80和海藻糖，所述吐温-80和海藻糖在生理盐水中的浓度分别为0.2-0.4％、0.5-1.5％。

6.如权利要求5所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述附加成分还包括薄荷冰，所述薄荷冰在生理盐水中的质量浓度为0.04％-0.05％。

7.如权利要求3所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述附加成分还包括壳聚糖，所述壳聚糖在生理盐水中的质量浓度为0.5-1.5％。

8.如权利要求6所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述鼻咽喷雾敷剂的制备方法包括以下步骤：

制备干细胞条件培养上清液；

制备人参与黄芪的混合提取物；

将人参与黄芪的混合提取物用生理盐水稀释至体积浓度为1％-4％，添加质量浓度为0.04％-0.05％的薄荷冰和质量浓度为0.2-0.4％的吐温80，制得第一混合液，将所述第一混合液高温高压灭菌，再加入质量浓度为0.5-1.5％的海藻糖和体积浓度为8％-10％的干细胞条件培养上清液混合均匀，分装入雾化吸入器内，即得鼻咽喷雾敷剂。

9.如权利要求1所述的鼻咽喷雾敷剂，其特征在于，所述上清液的离心速度为4000-4400rpm。