[发明专利]ACE2-Fc融合蛋白及其用途

说明书

本发明涉及融合蛋白及其在治疗冠状病毒引起的疾病中的应用，所述融合蛋白含ACE2部分和Fc段；其中，所述ACE2部分选自：ACE2蛋白胞外域或其突变体，所述胞外域含ACE2蛋白PD结构域的片段或其突变体；所述Fc段选自IgG1、IgG2和IgG4的Fc段或其突变体，且所述IgG1的Fc段无ADCC活性。

技术领域

本发明涉及Fc融合蛋白，尤其是ACE2与Fc的融合蛋白及其用途。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)导致的新冠肺炎重症比例为13.8％，危重病例比例为4.7％，其中危重病人的死亡率高达49％。新冠肺炎目前没有针对抗病毒感染的特效药，临床治疗以支持生命体征的对症治疗为主，所以亟待开发能够抑制病毒感染的有效治疗药物。

研究显示，新冠肺炎病毒(SARS-CoV-2)基因组序列与SARS病毒保持了70％的同源性，其用于发挥感染作用的S蛋白同源性达到76.47％；该病毒与SARS一样，均通过ACE2蛋白(血管紧张素转换酶2)来进行感染，其与ACE2亲和力达到15nM，是其与SARS S蛋白结合力的10到20倍。这种高亲和力造成2019-nCoV高传染性，而且提示可以用ACE2蛋白作为体内阻断SARS-CoV-2浸染的候选靶点。

传统的针对病毒的中和性抗体往往具有单一的表位，可能存在阻断效率低，且受到病毒变异影响中和效果的缺点，而ACE2蛋白作为SARS-CoV-2感染的必需受体，不受病毒变异的影响，且可以适用于SARS等其他同样采用ACE2作为感染受体的病毒的临床治疗。

Fc融合蛋白(Fc-fusion proteins)是近几年发展极快的一种生物制药研究方向。它是以免疫球蛋白的Fc段作为分子伴侣，通过分子生物学手段将功能性蛋白与之融合，从而极大地延长功能性蛋白的半衰期。Fc融合蛋白保持了功能性蛋白的活性，同时兼具免疫球蛋白的半衰期长及具有细胞毒性。

发明内容

本发明第一方面提供一种融合蛋白，所述融合蛋白含ACE2部分和Fc段；其中，所述ACE2部分选自：ACE2蛋白胞外域或其突变体，所述胞外域的含ACE2蛋白PD结构域的片段或其突变体；所述Fc段选自IgG1、IgG2和IgG4的Fc段或其突变体，且所述IgG1的Fc段无ADCC活性。

在一个或多个实施方案中，所述ACE2蛋白胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段为野生型胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段；所述胞外域或片段的突变体为无酶活的胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段，或者为糖基化位点发生部分或全部突变的胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段，或者为无酶活、且糖基化位点发生部分或全部突变的胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段，或者为具有酶活、但糖基化位点发生部分或全部突变的胞外域或其含ACE2蛋白PD结构域的片段。

在一个或多个实施方案中，突变的糖基化位点包括选自N53，N90，N103，N322，N432，N546，N690的一个或多个位点。优选地，突变的糖基化位点突变为A。

在一个或多个实施方案中，所述无酶活的胞外域或其片段为374和/或378位发生了突变的胞外域或其片段；优选为发生了H374N和/或H378N的胞外域或其片段。

在一个或多个实施方案中，所述胞外域的突变体与野生型ACE2蛋白胞外域的序列同一性为80％以上，优选85％以上，更优选90％以上，更优选95％以上，更优选97％以上，更优选99％以上；所述片段的突变体与野生型ACE2蛋白PD结构域的序列同一性为80％以上，优选85％以上，更优选90％以上，更优选95％以上，更优选97％以上，更优选99％以上。

在一个或多个实施方案中，所述融合蛋白为含两个ACE2部分的二价形式，或含四个ACE2部分的四价形式。

在一个或多个实施方案中，所述融合蛋白具有减弱的ACE2酶活。