[发明专利]一种鉴定苦瓜品种真实性的方法及其专用SSR引物组合有效
| 申请号: | 202010209970.8 | 申请日: | 2020-03-23 |
| 公开(公告)号: | CN111235301B | 公开(公告)日: | 2021-04-27 |
| 发明(设计)人: | 温常龙;罗江;韩向阳;张建;杨静静 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 荣红颖;王蔚林 |
| 地址: | 100097 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鉴定 苦瓜 品种 真实性 方法 及其 专用 ssr 引物 组合 | ||
1.鉴定苦瓜品种真实性的SSR引物组,其特征在于:
所述SSR引物组由第一SSR引物对,第二SSR引物对,第三SSR引物对,第四SSR引物对,第五SSR引物对,第六SSR引物对,第七SSR引物对,第八SSR引物对,第九SSR引物对,第十SSR引物对,第十一SSR引物对,第十二SSR引物对,第十三SSR引物对,第十四SSR引物对,第十五SSR引物对,第十六SSR引物对,第十七SSR引物对,第十八SSR引物对,第十九SSR引物对和第二十SSR引物对组成;
所述第一SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;
所述第二SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示;
所述第三SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;
所述第四SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示;
所述第五SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示;
所述第六SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示;
所述第七SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示;
所述第八SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示;
所述第九SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示;
所述第十SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示;
所述第十一SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示;
所述第十二SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示;
所述第十三SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26所示;
所述第十四SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28所示;
所述第十五SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30所示;
所述第十六SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32所示;
所述第十七SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34所示;
所述第十八SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36所示;
所述第十九SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38所示;
所述第二十SSR引物对的序列如序列表中的SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40所示;
每对所述引物对的一条引物连接有荧光分子,所述荧光分子选自ROX、TAMRA、FAM、HEX。
2.鉴定苦瓜品种真实性的SSR试剂盒,其特征在于:所述SSR试剂盒配制为PCR反应体系;所述PCR反应体系包括:
权利要求1所述SSR引物组。
3.如权利要求2所述的SSR试剂盒,其特征在于:
所述SSR引物组中的每一对的上游引物和下游引物在所述体系中浓度之比为1:1;所述上游引物和下游引物在体系中终浓度均为0.25μmol/L。
4.如权利要求2所述的SSR试剂盒,其特征在于:
所述体系还包括:
dNTPs:体系中终浓度为每种0.15mmol/L,
氯化镁:体系中终浓度为2.5mmol/L,
DNA聚合酶:体系中终浓度为0.05U/μL,
PCR缓冲液:由体系中终浓度为10-50mmol/L的氯化钾与体系中终浓度为1-10mmol/LpH7.5-9.0的Tris-HCL配制而成。
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