[发明专利]一种抑制素B定量检测试剂盒及使用方法

说明书

本发明提供一种抑制素B定量检测试剂盒及使用方法，检测试剂盒提供的系统反应液，添加了氧化剂、SDS，在对抑制素B进行检测中，样本进行氧化处理不用单独进行，实现样本边氧化边反应的反应模式；本申请提供的抑制素B定量检测试剂盒，克服了现有检测抑制素B方法存在的反应时间长、操作步骤较复杂等的不足，具有省时、便于操作和灵敏度高、特异性强的特点。

技术领域

本发明属于免疫诊断技术领域，具体涉及一种抑制素B定量检测试剂盒及使用方法。

背景技术

抑制素(inhibin,INH)是细胞因子中转化生长因子-β(TGF-β)超家族的成员之一，是由α-亚基和β-亚基通过二硫键连接组成的异二聚体糖蛋白激素。β-亚基又分为βA和βB两种形式，分别与α-亚基通过二硫键形成抑制素A(INHA)和抑制素B(INHB)。

抑制素B是卵巢储备功能和睾丸曲细精管功能的主要标记物，可以用于卵巢因素引起的女性不孕和曲细精管功能障碍引起的男性不育检测。在男性体内，抑制素B是睾丸来源的糖蛋白激素，成年男性体内血清抑制素B水平与FSH呈显著负相关，对FSH起负反馈作用。男性出生后不久，血清抑制素B水平逐渐上升，于青春期Ⅱ期达到成年人水平，从青春期Ⅲ期至成年，抑制素B与FSH之间一直维持负相关关系。20-30岁时，抑制素B水平到达另一个高峰，此后抑制素B水平随年龄增加逐渐降低。而在女性体内，抑制素B主要由卵巢的中、小窦状卵泡的颗粒细胞产生，可以反馈性抑制垂体前叶促卵泡激素(FSH)的释放，调节卵泡的生成。INHB水平比FSH更早、更直接的反应卵巢储备情况。

目前，抑制素B的酶联免疫法检测均采用生物素-链霉亲和素在内的双抗体夹心法系统，一方面反应时间比较长，另一方面操作步骤复杂，不便于在临床开展使用。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种抑制素B定量检测试剂盒及使用方法，检测试剂盒提供的系统反应液，添加了氧化剂、SDS，在对抑制素B进行检测中，样本进行氧化处理不用单独进行，实现样本边氧化边反应的反应模式；本申请提供的抑制素B定量检测试剂盒，克服了现有检测抑制素B方法存在的反应时间长、操作步骤较复杂等的不足，具有省时、便于操作和灵敏度高、特异性强的特点。

本发明的目的是以下述方式实现的：一种抑制素B定量检测试剂盒，包括包被有抗抑制素B抗体的包被板、包含抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液、和酶结合物，酶结合物为酶标记的针对抑制素B的单克隆抗体。

所述的抑制素B定量检测试剂盒，还包括系统反应液，系统反应液包括保护蛋白、缓冲液、SDS和氧化剂。

系统反应液还包括防腐剂。

氧化剂为过氧化氢；缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液；保护蛋白可以是牛血清白蛋白、Casein中的至少一种；防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种。

系统反应液每升中含有8-12g SDS，30％过氧化氢163-172ml。

系统反应液每升中含有8-12g SDS，30％过氧化氢163-172ml、牛血清白蛋白8-12g、Proclin 300 0.8-1.3ml。

包被板为包被针对抑制素B的α亚基的单克隆抗体的酶标板；酶标记的针对抑制素B的单克隆抗体为辣根过氧化物酶标记的针对抑制素B的βB亚基的单克隆抗体。

包含抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液分别为包含0pg/ml、20pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、400pg/ml、1200pg/ml浓度抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液。