[发明专利]一种抑制素B定量检测试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：包括包被有抗抑制素B抗体的包被板、包含抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液、和酶结合物，酶结合物为酶标记的针对抑制素B的单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：还包括系统反应液，系统反应液包括保护蛋白、缓冲液、SDS和氧化剂。

3.根据权利要求2所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：系统反应液还包括防腐剂。

4.根据权利要求2所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：氧化剂为过氧化氢；缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液；保护蛋白可以是牛血清白蛋白、Casein中的至少一种；防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种。

5.根据权利要求2所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：系统反应液每升中含有8-12g SDS，30%过氧化氢 163-172ml。

6.根据权利要求2所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：系统反应液每升中含有8-12g SDS，30%过氧化氢 163-172ml、牛血清白蛋白8-12g、Proclin 300 0.8-1.3ml。

7.根据权利要求1所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：包被板为包被针对抑制素B的α亚基的单克隆抗体的酶标板；酶标记的针对抑制素B的单克隆抗体为辣根过氧化物酶标记的针对抑制素B的βB亚基的单克隆抗体。

8.根据权利要求1或7所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：包含抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液分别为包含0pg/ml、20pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、400pg/ml、1200pg/ml浓度抑制素B抗原的系列梯度校准品溶液。

9.根据权利要求1或7所述的抑制素B定量检测试剂盒，其特征在于：包被板中使用的包被液为pH7.4的Tris溶液、pH7.4的PBS溶液中的一种，所用的针对抑制素B的α亚基的单克隆抗体的浓度为2-10ug/ml，所用的封闭液是含有牛血清白蛋白的pH7.4的Tris-HCl溶液；酶结合物的制备中使用的缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，所用的保护蛋白为小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一种，所用的防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种，酶结合物还包括清洁抗体；校准品的制备中使用的缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，所用的保护蛋白为牛血清白蛋白、Casein中的至少一种，所用的防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种；酶标记的抗抑制素B单克隆抗体与酶结合物稀释液按体积比1:（2200—2800）的比例混合得到酶结合物。

10.根据权利要求1-9任一权利要求所述的抑制素B定量检测试剂盒的使用方法，其特征在于：包括以下步骤，

（1）加样：取出一定量的包被板上编号的包被孔，依次加入50µl校准品及待测样本，然后分别加入50µl系统反应液，再加入酶结合物50µl；

（2）温育：将加样后的包被板置37℃环境温度下60分钟；

（3）洗涤：甩去包被孔内液体，用稀释后的洗涤液注满各包被孔，静置20秒，甩掉，如此反复洗涤5次，每次均需甩净液体，最后在吸水纸上拍干；

（4）显色：每包被孔加底物液100µl，18-23℃下避光反应20分钟；

（5）终止：每包被孔加终止液50µl，终止反应。