[发明专利]心肺五联检测试剂盒及其稀土纳米荧光检测卡和检测方法

权利要求书

1.稀土纳米荧光检测卡，其特征在于：包括卡壳（1）和设置在卡壳（1）内的检测试纸条（2）；所述检测试纸条（2）包括底衬（21）以及沿底衬的长度方向顺次搭接粘贴在底衬上的样品垫（22）、包被膜（23）和吸水纸（24）；所述样品垫（22）喷涂有微球线；所述微球线为稀土纳米荧光微球标记的cTnI 1/CKMB 1/Myo 1/D-Dimer 1/NT-proBNP 1单克隆抗体和兔IgG抗体；所述包被膜（23）包括硝酸纤维素膜以及沿长度方向依次平行间隔设置于硝酸纤维素膜上的第一检测线、第二检测线、第三检测线、第四检测线、第五检测线和质控线；所述第一检测线、第二检测线、第三检测线、第四检测线、第五检测线和质控线分别包被cTnI 2/CKMB2/Myo 2/ D-Dimer 2/NT-proBNP 2和羊抗兔抗体，其中第一检测线靠近样品垫（22），质控线远离样品垫（22）；

所述稀土纳米荧光微球为核壳结构钕掺杂氟化钆镥包覆氟化钇钠，粒径为40nm~60nm，其组成为：

NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4，

其中，NaGdxLu1-xF4为基质，掺杂离子为Nd³⁺；冒号“:”表示为钕掺杂；x和y为稀土离子掺杂摩尔百分数，x的范围为20%～90%，y的范围为1%~10%；

所述稀土纳米荧光微球在基态下稳定，在800~1000 nm的激发光源作用下发射出波长范围在1000~1100 nm的荧光；

所述NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4的制备方法包括：

步骤①，合成NaGdxLu1-y-xF4:yNd：在容器中，加入体积比为3~6：7~14 的油酸和1-十八烯，再按摩尔比例，加入x份Gd的硝酸盐或醋酸盐或氯化物，y份钕的硝酸盐或醋酸盐或氯化物，1-x-y份的Lu的硝酸盐或醋酸盐或氯化物，x和y为稀土离子掺杂摩尔百分数，x的范围为20%～70%， y的范围为0~30%；在室温下混合搅拌，抽真空，随后升温至100~120℃，反应20~30分钟，再升温至150~160℃，反应10~15分钟，得到透明溶液；自然冷却至40~50℃，释放真空，加入物质的量之比为1~2 ：1.6~3.4的NaOH和氟化铵甲醇混合溶液，反应20~30 min；升温至90~100℃，抽气换气3~4次，通入氮气，升温至280~300℃，反应1~2小时，离心，用环己烷乙醇混合液洗涤3~4次，分散于环己烷中；

步骤②，制备NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4：在容器中，加入体积比为3~6 ：7~14油酸和1-十八烯，加入醋酸钇，混合搅拌，在室温下混合搅拌，抽真空，随后升温至120℃，反应20分钟，再升温至160℃，反应10分钟，得到透明溶液；自然冷却至50℃，释放真空，加入NaOH和氟化铵甲醇混合溶液，以及与油酸体积比为3~6：2~4的 NaGdxLu1-y-xF4:yNd纳米探针环己烷溶液，混合搅拌，反应20~30 min；升温至90~100℃，抽气换气3~4次，通入氮气，升温至280~290℃，反应1~2小时，离心，用环己烷乙醇混合液洗涤3~4次，分散于环己烷中；所述醋酸钇、NaOH、氟化铵物质的量之比为0.2~0.4：0.5~1 ：0.8~1.6；利用酸洗法将探针转移至水相，再在探针表面修饰羧基，得到分散性好的水溶性NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4稀土纳米荧光微球。

2.根据权利要求1所述的稀土纳米荧光检测卡，其特征在于：所述样品垫（22）上喷涂的稀土纳米荧光微球标记的cTnI 1/CKMB 1/Myo 1/D-Dimer 1/NT-proBNP 1单克隆抗体和兔IgG抗体的含量均为50~200µg抗体/200µl荧光微球。

3.根据权利要求1所述的稀土纳米荧光检测卡，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上的第一检测线、第二检测线、第三检测线、第四检测线、第五检测线和质控线的间隔距离为2~4mm。

4.根据权利要求3所述的稀土纳米荧光检测卡，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上的cTnI 2/CKMB 2/Myo 2/D-Dimer 2/NT-proBNP 2单克隆抗体包被浓度为0.1~2mg/ml、用量为0.5~1.5µl包被液量/cm膜，羊抗兔IgG抗体包被浓度为0.5~2mg/ml、用量为0.5~1.5µl包被液量/cm膜。