[发明专利]一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法

权利要求书

1.一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、取动物组织于离心管中，加入STE缓冲液，使用涡旋振荡器，混合0.5-2h，得溶液一，每毫克动物组织加入1mLSTE缓冲液；

S2、向溶液一中加入10％的十二烷基磺酸钠溶液和10mg/μL的蛋白酶K，用封口膜封口，放入翻转离心装置的离心管槽(27)中，盖上固定盖(26)，并用锁紧杆(26)锁紧固定盖(26)，启动电热丝(17)和风扇(18)，升温至35-50℃，启动第二电机(11)，翻转离心管5-10h，得溶液二；

S3、将离心管冷却至室温，先向溶液二中加入Tris-饱和酚，置于翻转离心装置中，启动第二电机(11)，翻转摇匀0.5-1h，再加入氯仿和异戊醇的混合溶液，继续翻转摇匀0.5-1h，然后关闭第二电机(11)，启动第一电机(5)离心15～30min，得溶液三；

S4、将溶液三中的上清液转移至另一离心管中，加入-20～-10℃的无水乙醇，启动第一电机(5)离心15～30min，析出团状物后用移液枪吸入干净的离心管中，用75％乙醇洗涤两次，晾干后即得纯化后的核酸。

2.根据权利要求1所述的一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，步骤S2中所述翻转离心装置包括外壳(1)，外壳(1)底端面上固定连接有两个第一转轴(2)，第一转轴(2)上均转动连接有皮带轮(3)，皮带轮(3)之间通过皮带(4)传动连接，其中一个皮带轮(3)上方设置有第一电机(5)，第一电机(5)的驱动轴与皮带轮(3)顶端面固定连接，另一个皮带轮(3)顶端面固定连接有连接块(6)，连接块(6)顶端面固定连接有支撑板(7)，支撑板(7)顶端面固定连接有两根电动伸缩杆(8)，两根电动伸缩杆(8)分别位于支撑板(4)两端，两根电动伸缩杆(8)的伸缩端一个固定连接有转动块(9)，另一个固定连接有第二电机(11)，转动块(9)与第二电机(11)之间转动连接有离心管架(10)，第二电机(11)的驱动轴与离心管架(10)的侧壁固定连接；

外壳(1)顶端面开设有缺口，缺口上设置有取样盖(12)，取样盖(12)通过第二转轴(13)转动连接在外壳(1)顶端面上，外壳(1)顶端面内侧壁固定连接有竖直隔板(14)，竖直隔板(14)下端延伸至外壳(1)内部下端，且固定连接有第一水平隔板(15)，竖直隔板(14)一端固定连接在外壳(1)内侧壁下端，连接块(6)贯穿第一水平隔板(15)设置，竖直隔板(14)上端开设有出风口(16)，出风口(16)远离离心管架(10)的一侧固定连接有电热丝(17)，电热丝(17)一侧设置有风扇(18)，风扇(18)固定连接在外壳(1)内侧壁上，位于风扇(18)一侧的外壳(1)侧壁安装有通风格栅(19)，电热丝(17)和风扇(18)位于第一电机(5)上方，且中间设置有第二水平隔板(20)。

3.根据权利要求2所述的一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，所述支撑板(7)底端面两端开设有滑轮槽(21)，滑轮槽(21)内侧壁固定连接有金属框(22)，金属框(22)内安装有滑轮(23)，滑轮(23)的转轴转动连接在金属框(22)内侧壁上，第一水平隔板(15)顶端面开设有滚动槽(24)，滚动槽(24)与滑轮(23)相匹配。

4.根据权利要求2所述的一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，所述离心管架(10)包括底架(25)和固定盖(26)，固定盖(26)卡合在底架(25)顶端面上，底架(25)顶端面开有若干个离心管槽(27)，且底架(25)顶端面转动连接有锁紧杆(28)。

5.根据权利要求2所述的一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，步骤S2中所述十二烷基磺酸钠溶液、蛋白酶K和溶液一的体积比为0.1～0.3：0.02～0.05：1。

6.根据权利要求2所述的一种用于基因测序的细胞组织核酸提取方法，其特征在于，步骤S3中所述Tris-饱和酚、氯仿和异戊醇的体积比为25～30：20～24：1。