[发明专利]一种具有pH广泛稳定性的适冷褐藻胶裂解酶AlgL2及其应用在审
申请号: | 202010170519.X | 申请日: | 2020-03-12 |
公开(公告)号: | CN111218439A | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 王海英;王致鹏;纪晓峰 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/42;C12P19/14;C12R1/84 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 梁正贤 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 ph 广泛 稳定性 褐藻 裂解 algl2 及其 应用 | ||
本发明涉及一种具有广泛pH稳定性的适冷褐藻胶裂解酶AlgL2及其应用。属于生物工程技术领域,该酶最适反应温度为30℃,最适反应pH为9,且pH广泛稳定,在pH4.0‑11.0范围内酶活保留率都高达70%。该酶降解方式为内切,是偏PolyG型褐藻胶降解酶,降解主产物为单糖至六糖。利用基因工程的技术方法获得发酵液酶活力高达19.09U/mL,具有工业化生产的潜质。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种具有pH广泛稳定性的适冷褐藻胶裂解酶AlgL2及其应用。
背景技术
褐藻胶是由互为差向异构体的β-D-古罗糖醛酸和α-L-甘露糖醛酸通过1,4糖苷键连接而成的线性多糖,是褐藻多糖的主要成分,约占褐藻干重的30%左右。褐藻胶广泛应用在食品、印染、医药等领域。然而,由于褐藻胶聚合度高,相对分子量大,机体吸收利用度差,在一定程度上限制了应用。由褐藻胶降解获得的褐藻寡糖一般为2~10聚合度,功能活性和应用价值比多糖更高。据报道,褐藻寡糖具有抗凝血,降血脂,促进细胞生长,抗自由基,抗病毒,坑肿瘤等多种功能,并能提高动物免疫力,促进植物生长,诱导植物抗逆性,在医药、食品保健、饲料添加剂、肥料等领域应用更广。
褐藻胶主要通过三种方法降解为褐藻寡糖:化学降解法(酸解法、碱解法和氧化法)、物理降解法(辐射法)和生物降解法(微生物发酵和酶法)。酶解法降解褐藻胶反应条件温和、过程易于控制,产物特异性强,且绿色环保。用酶法降解褐藻胶取代传统的物理法、化学法已成趋势,褐藻胶裂解酶作为降解褐藻胶的工具酶,对它的研究具有实际价值。目前尚无高效且廉价的商品化褐藻胶裂解酶,因此寻找不同来源及不同类型的褐藻胶裂解酶在海洋资源的开发利用及水产养殖研究中具有重要价值,已成为当前研究的新热点。
发明内容
本发明提供了一种具有广泛pH稳定性的适冷褐藻胶裂解酶AlgL2及其应用。该酶最适反应温度为30℃,最适反应pH为9,且pH广泛稳定,在pH4.0-11.0范围内酶活保留率都高达70%。。该酶降解方式为内切,是偏PolyG型褐藻胶降解酶,降解主产物为单糖至六糖。
本发明提供一种褐藻胶裂解酶AlgL2,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
SEQ ID NO.1:
QQAYPVPADKFDMMNWKITVPEDRDKNGKIDEIEGVAMFSYSNPDYFFLDDDGNMVFQVQNKAITTSGSSNARSELRQMLRGTDLTIDVKAPANNFAIAAHPNAKQYGAIGGKLSATLKVNHVATHANQPDKYPAYSVVVGQIHANKDPKLMETNSGFGYGNEPLKIFYKKWPGHTTGSVFWNYERNLEKDDPNRTDIAYPVWGNTWENKADPKEAGLALGEEFSYVVDVKGNIMHLTFTTKNHKTVEYKIDLSKNLTPSGEVDSKDNPHGYAGDSFYFKAGAYGQCSVKDDEGFWSPGCAGTGDFATDVKNGDYNSVSFSKLELSK
另一方面,本发明还提供一种褐藻胶裂解酶AlgL2对应的核苷酸序列,如SEQ IDNO.2所示。
SEQ ID NO.2:
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