[发明专利]降糖灵口服液指纹图谱检测方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开一种降糖灵口服液指纹图谱检测方法及其指纹图谱，属中药制剂指纹图谱检测技术领域。它包括混合对照品溶液的制备，供试品溶液的制备；高效液相色谱条件的确定；标准指纹图谱的建立；待测降糖灵口服液的质量检测，以及结合化学计量学分析法对所述降糖灵口服液的质量进行分析；其中，所述化学计量学分析法包括聚类分析法和主成分分析法。本发明建立的以相似度评价、聚类分析和主成分分析为核心的化学模式识别方法从不同的侧重角度对不同批次的降糖灵口服液进行质量分析，为其制剂的质量控制提供了科学的评价方法。

技术领域

本发明属中药制剂指纹图谱检测技术领域，尤其涉及一种降糖灵口服液指纹图谱检测方法及其指纹图谱。

背景技术

降糖灵口服液组方是根据《证治汇补》中的黄芪葛根汤以及明代医家龚廷贤所著《寿世保元》之经典名方麦味地黄丸加减化裁而来，选取多种天然中药材采用现代工艺精心制作而成的中医复方制剂。具有益气养阴、生津止渴、清热泻火、益肾缩尿之功效，临床上用于降血糖、治疗糖尿病。50多年临床应用证明，其与传统中医治疗方针相匹配的处方组成和良好的疗效，使其沿用至今并得到了广大患者的信赖与好评。其组成包括生地黄、黄芪、天冬、天花粉、枸杞子、覆盆子、粉葛、熟地黄、泽泻，现代药理研究证明其含有多种生物活性成分。现有的降糖灵口服液质量标准仅对其主要组成药材之一黄芪进行了定性鉴别，这对于中药成分复杂、其他多种有效成分尚不十分明确的复方中药制剂来说，单纯依靠测定某一有效组成、忽略其他有效成分来进行解决质量检测和确定不同批次间质量差异的问题显然是不全面也不科学的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种降糖灵口服液指纹图谱检测方法及其指纹图谱，克服了现有降糖灵口服液质量控制技术的不足，使其质量控制更加完善和科学，达到控制降糖灵口服液质量进而监控药品安全生产的目的。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

它包括以下步骤：

（1）混合对照品溶液的制备：

精密称定葛根素10.05mg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷10.08mg，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到葛根素贮备液和毛蕊异黄酮葡萄糖苷贮备液；再分别精密量取上述葛根素贮备液1.0mL、毛蕊异黄酮葡萄糖苷贮备液1.0mL，并置于同一10mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，得到混合对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：

精密量取降糖灵口服液10.0mL于分液漏斗中，用水饱和正丁醇萃取 3次，每次25mL，合并萃取液，用水饱和正丁醇洗涤两次，每次25ml，弃去洗液，正丁醇液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至 5mL量瓶中，加甲醇至刻度，滤过，取续滤液过0.45微孔的滤膜，得到供试品溶液；

（3）高效液相色谱条件为：

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGⅡ，4.6×250mm，5μm；

测定波长：254nm；

柱温：25℃；

进样体积：5µL；

流动相：0.2 %磷酸水溶液-甲醇；

流速：1.0mL/min；

采用梯度洗脱方式洗脱50min，梯度洗脱程序见表1：

表1 梯度洗脱程序

（4）标准指纹图谱的建立：