[发明专利]降糖灵口服液指纹图谱检测方法及其指纹图谱

权利要求书

1.一种降糖灵口服液指纹图谱检测方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）混合对照品溶液的制备：

精密称定葛根素10.05mg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷10.08mg，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到葛根素贮备液和毛蕊异黄酮葡萄糖苷贮备液；再分别精密量取上述葛根素贮备液1.0mL、毛蕊异黄酮葡萄糖苷贮备液1.0mL，并置于同一10mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，得到混合对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：

精密量取降糖灵口服液10.0mL于分液漏斗中，用水饱和正丁醇萃取 3次，每次25 mL，合并萃取液，用水饱和正丁醇洗涤两次，每次25ml，弃去洗液，正丁醇液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至 5mL量瓶中，加甲醇至刻度，滤过，取续滤液过0.45微孔的滤膜，得到供试品溶液；

（3）高效液相色谱条件为：

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGⅡ，4.6×250mm5μm；

测定波长：254nm；

柱温：25℃；

进样体积：5µL；

流动相：0.2 %磷酸水溶液-甲醇；

流速：1.0mL/min；

采用梯度洗脱方式洗脱50min，梯度洗脱程序见表1：

表1 梯度洗脱程序

（4）标准指纹图谱的建立：

将12批降糖灵口服液分别按照上述步骤（2）制成供试品溶液，同时将葛根素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷按照上述步骤（1）制得混合对照品溶液，将制得的12批供试品溶液和混合对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中，按照上述步骤（3）的高效液相色谱条件进行检测，分别记录50min内混合对照品溶液和这个12批供试品溶液的图谱及数据，并将得到的这些图谱及数据导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统中进行分析，建立降糖灵口服液的标准指纹图谱；

（5）待测降糖灵口服液的质量检测：

将待测降糖灵口服液按照上述步骤（2）制成待测供试品溶液，同时将葛根素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷按上述步骤（1）制成混合对照品溶液，将制得的测供试品溶液和混合对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中，按照上述步骤（3）的高效液相色谱条件进行检测，分别记录50min内测供试品溶液和混合对照品溶液的图谱及数据，将得到的这些图谱及数据与上述步骤（4）建立的标准指纹图谱比较，计算相似度，识别所具有的共同吸收峰的数量，确定相似度。

2.根据权利要求1所述的降糖灵口服液指纹图谱检测方法，其特征在于：所述降糖灵口服液是以生地黄、黄芪、天冬、天花粉、枸杞子、覆盆子、粉葛、熟地黄、泽泻为有效成分原料制成的。

3.根据权利要求1或2所述的降糖灵口服液指纹图谱检测方法，其特征在于：结合化学计量学分析法对所述降糖灵口服液的质量进行分析。

4.根据权利要求3所述的降糖灵口服液指纹图谱检测方法，其特征在于：所述化学计量学分析法包括聚类分析法和主成分分析法。