[发明专利]一种用于生物制品残留物检测试剂盒

说明书

本发明涉及免疫学技术领域，具体涉及到一种用于生物制品残留物检测试剂盒。包括标准抗原、阴阳性对照液、抗CHO HCP、SPA、牛IgG蛋白抗体包被的酶标板、辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗CHO HCP、牛IgG蛋白抗体溶液和辅助试剂。所述辅助试剂包括底物液A、底物液B和终止液；所述底物液B为四甲基联苯胺的溶液；所述底物液A为过氧化氢脲的溶液。本发明提供的用于生物制品残留物检测试剂盒利用双抗体夹心法ELISA对上述CHO HCP、SPA、牛IgG四种残留物进行定量分析；操作时间短，技术人员短期培训即能掌握检测技术；能进行高通量检测，进而有效提高质控过程的效率；灵敏度高；成本低，无需使用昂贵的实验设备，能极大的降低企业检测成本。

技术领域

本发明涉及免疫学技术领域，具体涉及到一种用于生物制品残留物检测试剂盒。

背景技术

ELISA酶免法作为临床检测常用的方法，已延伸到许多学科领域，与以往的单纯酶免技术相比，如今已发展衍生多种形式，使得检测方法更具有省时省力，特异性强、灵敏度高等优点。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其它物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，通过反应而结合在固相载体上。此时固相上酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。

目前国内所有的利用真核表达或原核表达体系生产药用重组蛋白的企业，及其他生产治疗性抗体疫苗的生物医药企业，检测残留的非目标蛋白时使用的的都是进口检测试剂盒。进口试剂盒价格较高，是制约质控成本的关键因素之一。随着中国人力资源成本的升高，抗体及药物生产商必须尽量控制生产的成本，以追求利润的最大化。节省开支的重要途径之一，就是在保证产品质量，且不对生产工艺的前提下尽可能的使用中国本土生产厂家所提供的设备及耗材。抗体及重组蛋白药物的质控过程，是一个与生产工艺紧密相连但又相对独立的一个环节。改用国内的质控耗材，可以减少成本，但又不用对产品生产工艺大刀阔斧的改进。截至目前，2010版《中国药典》仅对残留的大肠杆菌和Vero细胞HCP有明确的规定检测方法，对残留的CHO HCP的检测没有明文的规定。《中国药典》对SPA、牛IgG的残留检测也没有规定。对BSA有严格的限定，不得超过50ng/剂量。因此，开发CHO HCP、SPA、牛IgG的残留量检测方法既能填补该领域的空白，也能为以后制定相关行业标准奠定基础。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供了一种用于生物制品残留物检测试剂盒，包括标准抗原、阴阳性对照液、抗CHO HCP、SPA、牛IgG蛋白抗体包被的酶标板、辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗CHO HCP、牛IgG蛋白抗体溶液和辅助试剂。

作为一种优选技术方案，所述辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗CHO HCP、SPA、牛IgG蛋白抗体按1:2000稀释使用。

作为一种优选技术方案，所述辅助试剂包括底物液A、底物液B；所述底物液B为四甲基联苯胺的溶液；所述底物液A为过氧化氢脲的溶液。

作为一种优选技术方案，所述底物液B的制备方法包括如下步骤：四甲基联苯胺阴阳性对照液20mg、无水乙醇8～10阴阳性对照液mL，加双蒸水至1阴阳性对照液000mL，过滤除菌即得。

作为一种优选技术方案，所述底物液A的制备发方法包括如下步骤：NaHPO14.60g、柠檬酸9.33g、过氧化氢脲0.52g，溶于三蒸水，终定容至1000mL，调至pH5.0～5.4即得。

作为一种优选技术方案，所述终止液为硫酸溶液，其浓度为1mol/L。