[发明专利]一种棉花叶蜜腺相关的分子标记InDel-GaNEC1、引物对及其应用在审
申请号: | 202010149636.8 | 申请日: | 2020-03-06 |
公开(公告)号: | CN111197103A | 公开(公告)日: | 2020-05-26 |
发明(设计)人: | 杨召恩;胡伟;秦文强;李付广;王鹏 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州中鼎万策专利代理事务所(普通合伙) 41179 | 代理人: | 徐文婷 |
地址: | 45511*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 棉花 蜜腺 相关 分子 标记 indel ganec1 引物 及其 应用 | ||
1.一种棉花叶蜜腺性状相关的分子标记InDel-GaNEC1,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.一种权利要求1所述分子标记InDel-GaNEC1在棉花分子标记辅助育种中的应用。
3.一种权利要求1所述分子标记InDel-GaNEC1在选育棉花有无叶蜜腺品种中的应用。
4.一种检测权利要求1所述分子标记InDel-GaNEC1的引物对,其特征在于,由正向引物InDel-GaNEC1-F和反向引物InDel-GaNEC1-R组成。
5.根据权利要求4所述引物对,其特征在于,正向引物InDel-GaNEC1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示,反向引物InDel-GaNEC1-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。
6.一种权利要求4所述引物对在棉花分子标记辅助育种中的应用。
7.一种权利要求4所述引物对在选育棉花有无叶蜜腺品种中的应用。
8.一种利用权利要求4所述引物对鉴别棉花叶蜜腺性状的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测棉花叶片的基因组DNA;
(2)以提取的基因组DNA为模板,利用引物对进行PCR扩增;
(3)将PCR扩增产物进行电泳,根据电泳条带,鉴别棉花叶蜜腺性状。
9.根据权利要求8所述的鉴别棉花叶蜜腺性状的方法,其特征在于,
PCR反应体系:dd H2O 20.2μl、10×Buffer(含Mg2+)2.5μl、dNTPs(25mM)0.15μl、Taq酶(5U/μl)0.15μl、10mM正向引物InDel-GaNEC1-F 0.5μl、10mM反向引物InDel-GaNEC1-R 0.5μl、模板1.0μl;
PCR反应程序:94℃预变性5min;94℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸20s,运行35个循环;最后72℃延伸3min。
10.根据权利要求8所述的鉴别棉花叶蜜腺性状的方法,其特征在于,鉴别棉花叶蜜腺性状的方法为:当目的条带为一条,且目的条带长158bp时,可以确定待测棉花具有正常的叶蜜腺;当目的条带为一条,且目的条带长143bp时,可以确定待测棉花不具有叶蜜腺;当目的条带为两条,且目的条带的长度分别为158bp和143bp时,可以确定待测棉花具有正常的叶蜜腺。
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