[发明专利]一种检测包虫病诊断的试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测包虫病诊断的试剂盒，其原料组成按重量份比包括：上游引物Eg‑F2‑4份、下游引物Eg‑R2‑4份、dNTp混合物3‑5份、DNA聚合酶1‑3份、Taq酶1‑3份、三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液2‑4份和无菌双蒸水6‑8份，本发明涉及试剂盒技术领域。该检测包虫病诊断的试剂盒，通过取待检虫体组织或人体、动物感染病灶3g放入含2ml保存液的试管中，充分混合后，采用2500转/分钟的速率离心10分钟，提取样本的全基因组DNA放置在PCR反应管中备用，该试剂盒对于包虫病的检测结果准确性较高，并且使用者操作起来较为简单，不易出现小病灶、非典型病灶的误诊、漏诊和分型困难的问题，另外对于包虫病的检测效率较高，能够及时并且准确的检测出包虫病。

技术领域

本发明涉及试剂盒技术领域，具体为一种检测包虫病诊断的试剂盒。

背景技术

包虫病又称棘球蚴病，是细粒棘球绦虫的幼虫感染人体所致的疾病，该病为人畜共患病，狗为终宿主，羊、牛是中间宿主；人因误食虫卵成为中间宿主而患包虫病，细粒棘球绦虫的成虫寄生在犬的小肠中，是带科绦虫中最小的一种，虫卵为圆形或椭圆形，直径约30～40um，内为六钩蚴，对外环境有较强的抵抗力。

目前，包虫病的诊断主要依靠于B超、CT等影像技术和病理检查，因方法自身限制，易造成小病灶、非典型病灶的误诊、漏诊和分型困难，尤其是对于包虫病主要流行的民族偏远地区，由于以上诊断技术水平的普遍偏低，更易出现误诊等问题；对于包虫病低流行区或非流行区，由于接触病例较少，缺乏相关经验，即便在一些三甲医院，同样存在错误诊断或分型的情况，对于包虫病的检测结果不准确，并且对于包虫病的检测效率较低。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种检测包虫病诊断的试剂盒，解决了目前对于包虫病的检测技术，容易造成小病灶、非典型病灶的误诊、漏诊和分型困难，对于包虫病检测结果准确性得不到保证，检测效率较低的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种检测包虫病诊断的试剂盒，其原料组成按重量份比包括：上游引物Eg-F2-4份、下游引物Eg-R2-4份、dNTp混合物3-5份、DNA聚合酶1-3份、Taq酶1-3份、三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液2-4份和无菌双蒸水6-8份。

优选的，其原料组成按重量份比包括：上游引物Eg-F2份、下游引物Eg-R2份、dNTp混合物3份、DNA聚合酶1份、Taq酶1份、三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液2份和无菌双蒸水6份。

优选的，其原料组成按重量份比包括：上游引物Eg-F4份、下游引物Eg-R4份、dNTp混合物5份、DNA聚合酶3份、Taq酶3份、三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液4份和无菌双蒸水8份。

优选的，其原料组成按重量份比包括：上游引物Eg-F3份、下游引物Eg-R3份、dNTp混合物4份、DNA聚合酶2份、Taq酶2份、三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液3份和无菌双蒸水7份。

优选的，所述上游引物Eg-F为5′-CTCTTTGATGTCACGCACGATTTC-3′，所述下游引物Eg-R为5′-ATCGTGGGCCGCTCTAGGCACC-3′，并且上游引物Eg-F与下游引物Eg-R的浓度均为10pmol/μL。

优选的，所述DNA聚合酶为耐热DNA聚合酶，并且耐热DNA聚合酶中的酶活性为2-6U/μL，耐热DNA聚合酶为化学修饰的热启动耐热DNA酶、抗体修饰的热启动耐热DNA酶中的一种或多种组合。

优选的，所述三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液的浓度为6mol/L，并且三羟甲基氨基甲烷盐酸溶液的pH＝8.5。

优选的，操作试剂盒检测包虫病具体包括以下步骤：