[发明专利]一种病毒蛋白的快速酶解与检测方法在审
| 申请号： | 202010145555.0 | 申请日： | 2020-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN111505177A | 公开（公告）日： | 2020-08-07 |
| 发明（设计）人： | 胡金波;王静;邓林涛 | 申请（专利权）人： | 上海元金生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/88 |
| 代理公司： | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人： | 汤俊明 |
| 地址： | 201600 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 蛋白 快速 检测 方法 | ||
1.一种病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将体外表达的病毒蛋白样本溶于盐酸中，震荡混匀；2)超声处理；3)向超声后的样品中加入与步骤1)等体积的盐酸，震荡混匀；4)孵育；5)将孵育后的样品超声，然后在12000-15000rpm离心5-10分钟；6)取上清液置于超滤管中真空抽滤，将滤液冻干后进行检测；7)将检测结果与数据库进行比对得蛋白鉴定结果，其中，所述步骤1)中，盐酸中含0.01-0.03mg/mL胃蛋白酶。
2.如权利要求1所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，步骤1)中病毒蛋白样本与盐酸的比例为1：(190-210)pg/μL。
3.如权利要求1或2所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，所述盐酸的浓度为18-22mM。
4.如权利要求1或3所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，步骤2)中超声2-4次，每次8-12秒。
5.如权利要求4所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，步骤2)中超声3次，每次10秒。
6.如权利要求1所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，所述步骤3)中的盐酸浓度和步骤1)中相同。
7.如权利要求1所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，在37℃培养箱或金属浴孵育1小时。
8.如权利要求1所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，步骤5)中将孵育后的样品超声8-12s，然后在12000-15000rpm离心5-10分钟。
9.如权利要求8所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，在14000rpm离心5-10分钟。
10.如权利要求1所述的病毒蛋白的快速酶解与检测方法，其特征在于，步骤6)中取上清液置于10kd超滤管中真空抽滤，将滤液冻干后进行LC-MS/MS检测。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海元金生物科技有限公司，未经上海元金生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010145555.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
