[发明专利]一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法及VIGS沉默系统有效
| 申请号： | 202010140663.9 | 申请日： | 2020-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN111321166B | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 刘菊华;金志强;李萌;徐碧玉;苗红霞;王卓;王静毅;贾彩红;张建斌 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/83 | 分类号： | C12N15/83;A01H5/08;A01H6/00 |
| 代理公司： | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人： | 张新蕊 |
| 地址： | 571101 *** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抑制 香蕉 果实 淀粉 降解 方法 vigs 沉默 系统 | ||
1.一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法，其特征在于，采用VIGS沉默系统转染香蕉果实，其中，所述VIGS沉默系统包括辅助病毒载体和表达病毒载体，所述辅助病毒载体为烟草脆裂病毒pTRV1，所述表达病毒载体为含有目的基因DNA片段的烟草脆裂病毒pTRV2，所述目的基因DNA片段如序列表中SEQ ID NO.1所示序列；所述VIGS沉默系统中，辅助病毒载体和表达病毒载体的比例为 1:(2-3)。
2.根据权利要求1 所述的方法，其特征在于，将香蕉果实浸没在含有权利要求1所述VIGS沉默系统的菌液中，采用真空渗透的方式侵染香蕉果实；
将侵染的果实放置于黑暗条件且相对湿度控制在70％-80％的智能培养箱中，放置一周，期间注意湿度及果实情况，之后检测淀粉含量变化。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，含有权利要求1或2所述VIGS沉默系统的菌液OD600浓度为0.4-1.2 ；侵染天数为5-7天；侵染后香蕉果实培育温度为17-29℃。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，菌液OD600浓度为0.4-1。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，侵染天数为5天。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，侵染后香蕉果实培育温度为20-26℃。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，侵染天数为5天，侵染后香蕉果实培育温度为23℃，菌液OD600浓度为0.8，菌液中辅助病毒载体和表达病毒载体的比例为1:3；或者
侵染天数为5天，侵染后香蕉果实培育温度为23℃，菌液OD600浓度为1，菌液中辅助病毒载体和表达病毒载体的比例为1:2。
8.一种VIGS沉默系统，其特征在于，所述VIGS沉默系统包括辅助病毒载体和表达病毒载体，所述辅助病毒载体为烟草脆裂病毒pTRV1，所述表达病毒载体为含有目的基因DNA片段的烟草脆裂病毒pTRV2，所述目的基因DNA片段如序列表中SEQ ID NO.1所示序列，辅助病毒载体和表达病毒载体的比例为1:(2-3)。
9.如权利要求8所述的VIGS沉默系统在抑制香蕉果实总淀粉含量降低中的应用。
10.如权利要求8所述的VIGS沉默系统在抑制香蕉果实直链淀粉含量降低中的应用。
11.如权利要求8所述的VIGS沉默系统在抑制香蕉果实中果糖和/或葡萄糖和/或蔗糖含量升高中的应用。
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