[发明专利]一种海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法

权利要求书

1.一种海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法，其特征在于，步骤如下：

待测样品采用超声辅助水提醇沉的方法提取海藻多糖粗品；利用Sevage法去除提取的海藻多糖粗品中的蛋白后，采用三氟乙酸水解海藻多糖；水解完成后加入NaOH中和水解液的酸度，过0.22μm滤膜后用于离子色谱-脉冲安培检测器检测，利用保留时间对待测样品中的糖类进行定性，将定性后糖类的峰面积导入该糖类对应的标准工作曲线中，计算获得该糖类的浓度，从而实现定量分析；

所述离子色谱-脉冲安培检测的检测条件为：

色谱柱：Dionex CarboPac PA10，250 mm×4 mm糖分析专用柱；

Dionex CarboPac PA10，50 mm×4 mm糖保护柱；

工作电极：Gold；

参比电极：AgCl电极；

工作电位：糖标准四电位，具体如下：

流速：1.0 mL/min；

柱温：25℃；

进样量：25 μL；

采用多级梯度洗脱程序进行洗脱；

所述洗脱程序中的A为超纯水，B为200 mM NaOH，C为500 mM NaAc；

所述离子色谱-脉冲安培检测过程中采用多级梯度洗脱程序；具体如下：

*Curve 5是线性；上述溶液均使用电阻率为18.2 MΩ·cm 以上的超纯水配制；

所述中性糖为岩藻糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖和乳糖；所述氨基糖为氨基半乳糖和氨基葡萄糖；所述糖醛酸为半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。

2.根据权利要求1所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法，其特征在于，所述标准工作曲线是由以下方法制备而成：

配制岩藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸的混合标准工作溶液，混合标准工作溶液浓度梯度分别为0.5 mg/L、2mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L；

上述混合标准溶液分别用于离子色谱-脉冲安培检测器检测，以标准溶液中岩藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸的浓度为横坐标，再以标准溶液中岩藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸在脉冲安培检测器上的响应值的峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线。

3.权利要求1或2所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法，其特征在于，所述的海藻为海带、紫菜、裙带菜中的至少一种。

4.权利要求1或2所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法在食品工业中糖类化合物分析检测中的应用。