[发明专利]一种由细菌驱动的生物马达联合递药系统的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 202010136135.6 | 申请日： | 2020-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN111249222B | 公开（公告）日： | 2022-08-26 |
| 发明（设计）人： | 张慧娟;朱玲;栗梦婷;侯琳;张振中;张红岭 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | A61K9/06 | 分类号： | A61K9/06;A61K47/36;A61K47/46;A61K48/00;A61K38/39;A61K31/704;A61P35/00 |
| 代理公司： | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人： | 聂孟民 |
| 地址： | 450001 河南省郑*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 驱动 生物 马达 联合 系统 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种由细菌驱动的生物马达联合递药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）BI-ES菌液的制备：将1-2μg内皮抑素质粒加入预冷的含有80-150μl感受态婴儿双歧杆菌悬液中，冰浴5-10分钟，转移到预冷的电击杯中电击，电压2.5kv，电容25μF，电阻200Ω，电击后迅速转移至1-5ml新鲜的含0.5M蔗糖的PYG液体培养基中，37℃厌氧复苏2-3h，在5000-6000r/min离心3-5min，收集菌体，迅速涂布于含AMP的TPY固体培养基平板，37℃厌氧培养72h，得菌落，取菌落接种于PYG液体培养基中，37℃厌氧培养至OD600为0.2，得浓度为3X108cfu/ml的BI-ES的菌液；
（2）BI-ES-FeAlg/DOX的制备：将分子量为2×105kDa的海藻酸钠0.9-1.8mg，溶解于9-18ml超纯水中，超声30分钟使其溶胀，再将4.8-9.6mg FeCl3·6H2O溶解于6-12 mL超纯水中，超声30分钟使其溶解；向海藻酸钠溶液加入步骤（1）制备的BI-ES菌液，磁力搅拌30 min混合均匀，再加入3-5mg阿霉素，磁力搅拌5 min，将FeCl3·6H2O溶液以1 mL/min的速度逐滴加至海藻酸钠溶液中，继续磁力搅拌反应3h，反应结束后，3000-4000 r/min离心3-5 min，弃去上清液，得沉淀，即为BI-ES-FeAlg/DOX凝胶的细菌驱动的生物马达联合递药系统。
2.根据权利要求1所述的由细菌驱动的生物马达联合递药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）BI-ES菌液的制备：将1.55μg内皮抑素质粒加入预冷的含有125μl感受态婴儿双歧杆菌悬液中，冰浴7.5分钟，转移到预冷的电击杯中电击，电压2.5kv，电容25μF，电阻200Ω，电击后迅速转移至2.5ml新鲜的含0.5M蔗糖的PYG液体培养基中，37℃厌氧复苏2.6h，在5800r/min离心4.3min，收集菌体，迅速涂布于含AMP的TPY固体培养基平板，37℃厌氧培养72h，得菌落，取菌落接种于PYG液体培养基中，37℃厌氧培养至OD600为0.2，得浓度为3X108cfu/ml的BI-ES的菌液；
（2）BI-ES-FeAlg/DOX的制备：将分子量为2×105kDa的海藻酸钠1.4mg，溶解于14ml超纯水中，超声30分钟使其溶胀，再将7.2mg FeCl3·6H2O溶解于9 mL超纯水中，超声30分钟使其溶解；向海藻酸钠溶液加入步骤（1）制备的BI-ES菌液，磁力搅拌30 min混合均匀，再加入4mg 阿霉素，磁力搅拌5 min，将FeCl3·6H2O溶液以1 mL/min的速度逐滴加至海藻酸钠溶液中，继续磁力搅拌反应3h，反应结束后，3500 r/min离心4.3min，弃去上清液，得沉淀，即为BI-ES-FeAlg/DOX凝胶的细菌驱动的生物马达联合递药系统。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于郑州大学，未经郑州大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010136135.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
