[发明专利]基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法

权利要求书

1.一种基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)优良单株选择，从草海桐中选择高抗盐碱、株型茁壮漂亮的植株作为优良单株；

(2)外植体选取及准备，从优良单株上选取幼嫩的叶片作为外植体，将选取的外植体依次进行清洗、消毒后吸干水分，备用；

(3)诱导培养，将消毒好的外植体接入到诱导培养基中培养得到愈伤组织，所述诱导培养基为MS培养基中添加0.3-0.7mg/L 2,4-D、30g/L蔗糖及7g/L琼脂所得；

(4)增殖培养，将诱导培养获得的愈伤组织接入到芽分化培养基中培养得到再生苗，所述芽分化培养基为MS培养基中添加0.8-1.2mg/L6BA、0.1-0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖及7g/L琼脂所得；

(5)生根培养，将增殖培养得到的再生苗转到生根培养基中后获得生根再生苗，所述生根培养基为1/2MS培养基中添加0.2-0.8mg/LNAA、10g/L蔗糖、1g/L花宝2号及7g/L琼脂所得；

(6)炼苗移栽，将生根再生苗放置在大棚里炼苗后，移栽到营养土与耶糠体积比为1:1的移栽基质中生长，即得草海桐种苗。

2.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述步骤(2)中进行清洗、消毒的方法进一步包括如下步骤：

(21)将选取的外植体用洗洁精清洗干净；

(22)将清洗干净的外植体用流水冲洗10-15min；

(23)用75％酒精消毒30-40s，再用2％次氯酸钠消毒10-12min，最后用无菌水冲洗3-4次。

3.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述诱导培养基为MS培养基中添加0.5mg/L 2,4-D、30g/L蔗糖及7g/L琼脂所得。

4.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述芽分化培养基为MS培养基中添加1.0mg/L6BA、0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖及7g/L琼脂所得。

5.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述生根培养基为1/2MS培养基中添加0.5mg/LNAA、10g/L蔗糖、1g/L花宝2号及7g/L琼脂所得。

6.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述诱导培养基、芽分化培养基及生根培养基的pH均为5.8。

7.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述步骤(3)中诱导培养的条件为：温度25℃，暗培养0-20d，光照培养20-50d，光照强度2500Lux。

8.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述步骤(4)中增殖培养的条件为：时间20-30d，温度28℃，光照强度3000Lux。

9.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述步骤(5)中生根培养的条件：时间25-30d，温度28℃，光照强度3000Lux。

10.如权利要求1所述的基于组织培养技术繁育草海桐种苗的方法，其特征在于，所述步骤(6)中生根再生苗在大棚中的炼苗时间为5-7d。