[发明专利]一种提高层析线性范围的方法及β-HCG荧光层析检测试纸条

说明书

本发明公开了一种提高层析线性范围的方法，将抗原划线于层析膜上作为质控线，抗体划线于层析膜上作为检测线，并在荧光层析检测试纸条的标记物垫上喷涂抗体‑荧光微球偶联物。通过对HCG荧光层析进行改进，可以使线性范围达到1‑200000mIU，不需稀释，测试更加快速，准确。本发明还公开一种β‑HCG荧光层析检测试纸条及其制备方法。

技术领域

本发明涉及荧光免疫层析技术领域，具体涉及一种提高层析线性范围的方法及β-HCG荧光层析检测试纸条。

背景技术

荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。对于带有多个抗原决定簇的大分子抗原(蛋白、病毒、致病菌等)，通常采用“三明治”型双抗夹心免疫层析方法，即待测物在流动相作用下先与荧光标记抗体结合，当到达检测线时再与包被抗体结合形成双抗夹心的“三明治”型。

HCG是胎盘合体滋养辰细胞所分泌的一种糖蛋白激素，它的主要功能是：维持黄体及降低母体淋巴细胞的活动，防止对胎儿的排斥反应。HCG结构中包括α，β两个亚基，α亚基与LH，FSH，TSH近似，尤其是与LH有较大的免疫交叉反应，β链为其独有，β亚基被用来制备特异性抗体测定中的HCG，专名为β-HCG。主要临床意义：a，妊娠诊断；b，先兆流产动态观察，判别预后良好；c，可作为绒癌、恶葡术后疗效观察的指标，应连续检测直至转阴为止。

β-HCG作为妊娠指标，孕妇在停经35-45天即可测出，直至分娩后4天消失。在妊娠12周内的HCG水平增长速度非常快，不像其他人体激素那样恒定。HCG的浓度每时每刻都在增加，胚胎正常发育时，HCG二次相隔48小时的定量检测，第二次增高幅度应不小于第一次的66％，在孕期9-12周时浓度达到最高峰，一般在100000-200000mIU/mL。

大多HCG检测(包括发光，酶免，荧光/胶体金层析)线性范围上限在10000-50000mIU，对于孕12周的样本需要稀释测定，一方面增加了检验科工作量，一方面因为基质效应的不同会有测试不准的风险。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明公开一种提高层析线性范围的方法及β-HCG荧光层析检测试纸条。通过对HCG荧光层析进行改进，可以使线性范围达到1-200000mIU，不需稀释，测试更加快速，准确。

本发明通过下述技术方案实现：

一种提高层析线性范围的方法，将抗原划线于层析膜上作为质控线，抗体划线于层析膜上作为检测线。

进一步的，在荧光层析检测试纸条的标记物垫上喷涂抗体-荧光微球偶联物。

一种β-HCG荧光层析检测试纸条，包括基板和基板上依次衔接的样品垫、标记物垫、层析膜和吸水垫，所述结合物垫上喷涂有HCG抗体-荧光微球偶联物，层析膜上划有检测线和质控线，检测线上为HCG抗体，质控线上为HCG抗原。

所述标记物垫为玻纤垫，所述层析膜为硝酸纤维素膜。

本发明将β-HCG抗原替代传统的抗体作为质控线，HCG抗原作为质控线划在HCG抗体即检测线后面，在检测HCG高浓度样本时，HCG抗体在T线已经饱和，质控线上的抗原同样本中的抗原共同争夺HCG抗体-荧光微球偶联物，造成随样本浓度升高，质控线荧光信号降低的现象，而T线与质控线的比值就随样本浓度的升高而升高，以此实现了高浓度样本的测定，提高了HCG测试的线性范围，高浓度样本不需多次稀释，测试更加快速，准确。

一种β-HCG荧光层析检测试纸条的制备方法，包括以下步骤：

(1)将HCG抗体-荧光微球偶联物喷涂在标记物垫上；