[发明专利]基于链霉亲和素化胶乳的MMP-3抗体复合物及其试剂盒在审
申请号: | 202010122471.5 | 申请日: | 2020-02-27 |
公开(公告)号: | CN111320696A | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 熊盛;周伟;毛晓波;石庆同 | 申请(专利权)人: | 上海捷门生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/40 | 分类号: | C07K16/40;G01N33/573;G01N33/543 |
代理公司: | 上海上谷知识产权代理有限公司 31342 | 代理人: | 蔡继清 |
地址: | 201806 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 亲和 胶乳 mmp 抗体 复合物 及其 试剂盒 | ||
1.一种MMP-3单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-聚苯乙烯胶乳颗粒复合物,其特征在于,所述复合物由链霉亲和素化聚苯乙烯胶乳颗粒与生物素化MMP-3单克隆抗体通过生物素和链霉亲和素相连得到;其中,链霉亲和素化聚苯乙烯胶乳颗粒与生物素化MMP-3单克隆抗体的质量比为1:3。
2.如权利要求1所述的MMP-3单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-聚苯乙烯胶乳颗粒复合物的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)将聚苯乙烯胶乳颗粒溶于在MES缓冲液中,得到胶乳溶液;将EDAC溶于水中,得到EDAC溶液;将上述胶乳溶液、EDAC溶液和链霉亲和素混合后进行反应,反应结束后,收集固体;然后将得到的固体重悬于MES缓冲液中,得到含有链霉亲和素化聚苯乙烯胶乳颗粒的MES缓冲液溶液;
(2)用碳酸氢钠缓冲液对MMP-3单克隆抗体进行透析,得到MMP-3抗体溶液;将N-羟基琥珀酰亚胺生物素溶于DMSO中,得到N-羟基琥珀酰亚胺生物素溶液;将MMP-3抗体溶液和N-羟基琥珀酰亚胺生物溶液混合后进行反应,反应结束后,淬灭反应;然后用PBS缓冲液进行透析,得到含有生物素化MMP-3单克隆抗体的PBS缓冲液溶液;
(3)将上述步骤得到的含有链霉亲和素化聚苯乙烯胶乳颗粒的MES缓冲液溶液与含有生物素化MMP-3单克隆抗体的PBS缓冲液溶液混合并进行交联,从而得到MMP-3单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-聚苯乙烯胶乳颗粒复合物;其中,链霉亲和素化聚苯乙烯胶乳颗粒与生物素化MMP-3单克隆抗体的质量比为1:3。
3.一种MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含试剂R1和试剂R2;其中,所述试剂R1含有缓冲液、电解质、增浊剂和防腐剂;所述试剂R2含有权利要求1所述的MMP-3单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-聚苯乙烯胶乳颗粒复合物、稳定剂、缓冲液、电解质、保护剂和防腐剂。
4.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述缓冲液为pH为6.0的MES缓冲液。
5.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述电解质各自独立地选自下组:氯化钠、氯化钾或其组合。
6.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述稳定剂选自下组:牛血清白蛋白、酪蛋白、脱脂奶粉或其组合。
7.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述增浊剂选自下组:聚乙二醇-8000、聚乙二醇-6000、聚乙二醇-4000或其组合。
8.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述防腐剂各自独立地选自下组:叠氮钠、Proclin300或其组合。
9.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,所述保护剂选自下组:蔗糖、甘露醇、海藻糖或其组合。
10.如权利要求3所述的MMP-3检测试剂盒,其特征在于,
所述试剂R1中,各成分的含量如下:
所述试剂R2中,各成分的含量如下:
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