[发明专利]一种新型冠状病毒SARS-CoV-2疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种治疗和/或预防新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)感染或新型冠状病毒疾病(COVID‑19)的疫苗制备方法，所述的疫苗核心抗原包括新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)的RBD融合蛋白，所述的疫苗形式包括RBD融合蛋白亚单位疫苗、RBD融合蛋白mRNA疫苗或RBD融合蛋白腺病毒载体疫苗。上述疫苗在免疫机体后可产生治疗和/或预防新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)感染的免疫反应，用于治疗和/或预防新型冠状病毒疾病(COVID‑19)。本发明还涉及新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)的RBD融合基因、RBD融合蛋白、载体、细胞、制备方法、治疗方法或制药用途。

技术领域

本发明属于疫苗技术领域，具体涉及将新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的RBD融合基因，设计成RBD融合蛋白亚单位疫苗、RBD融合蛋白mRNA疫苗、或者RBD融合蛋白腺病毒载体疫苗，上述疫苗在免疫机体后可产生预防新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的免疫反应，用于预防新型冠状病毒疾病(COVID-19)。

背景技术

冠状病毒为不分节段的单股正链RNA病毒，属于巢病毒(Nidovirales)冠状病毒(Coronaviridae)正冠状病毒亚科(Orthocoronavirinae)，根据血清型和基因组特点，冠状病毒亚科被分为α、β、γ和δ四个属。迄今为止，共有7种冠状病毒可感染人类：包括α属的229E和NL63，β属的OC43和HKU1、中东呼吸综合征相关冠状病毒(MERSr-CoV)、严重急性呼吸综合征相关冠状病毒(SARSr-CoV)和新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。

冠状病毒属的病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒，直径约80～120nm，基因组为27～32Kb，其遗传物质是所有RNA病毒中最大的，具有正链RNA特有的重要结构特征：即RNA链5’端有甲基化“帽子”，3’端有PolyA“尾巴”结构。这一结构与真核mRNA非常相似，也是其基因组RNA自身可以发挥翻译模板作用的重要结构基础，而省去了RNA- DNA-RNA的转录过程，该特点使其极易变异。冠状病毒可感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类等脊椎动物。冠状病毒有包膜，包膜上存在棘突，整个病毒像日冕，不同的冠状病毒的棘突有明显的差异。在冠状病毒感染细胞内有时可以见到管状的包涵体。

S蛋白是冠状病毒最重要的表面蛋白，与病毒的传染能力相关。S蛋白含有两个亚基： S1和S2，其中S1主要包含受体结合区域(RBD)，负责识别细胞受体；S2含有膜融合过程所需的基本元件。S蛋白承担病毒与宿主细胞膜受体结合及膜融合功能；S蛋白决定了病毒的宿主范围和特异性；S蛋白通过受体结合区(RBD)的基因重组或突变可以实现不同宿主间传播，并导致较高致死率；S蛋白可产生中和抗体，因此，S蛋白是疫苗设计的重要候选抗原。

尽管S蛋白是冠状病毒疫苗开发的首选抗原，但是有关SARS-CoV疫苗研究，结果表明，S蛋白诱发的抗体可引发抗体依赖的增强作用(antibody dependent enhancement,ADE)；目前有关新型冠状病毒疫苗开发的报道不多，但是考虑到新型冠状病毒和SARS的同源性很高，因此，针对新型冠状病毒S蛋白设计的疫苗是否可引起ADE，是疫苗设计之初需要考虑的重要问题。

本发明基于RBD设计融合蛋白，该融合蛋白产生的抗体可阻止新型冠状病毒与宿主细胞的识别。新型冠状病毒S蛋白中的RBD功能明确，负责识别受体细胞的ACE区，因此针对RBD产生的抗体功能明确，避免诱导机体产生抗体依赖的增强作用(antibody dependentenhancement,ADE)。

发明内容