[发明专利]一种从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法

权利要求书

1.一种从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，包含如下步骤：

(1)从鸽蛋中分离蛋清液，然后将蛋清液稀释后充分搅拌，经离心过滤后取上清液；

(2)接着在上清液中加入FeCl₃·6H₂O、碳酸氢钠以及氯化钠继续充分搅拌；

(3)再向上清液中加入乙醇，使得溶液中乙醇体积浓度达到40～45％，搅拌均匀后经静置、离心得沉淀1和滤液；

(4)在滤液中继续加入乙醇，使得滤液中乙醇体积浓度达到55～65％，搅拌均匀后经静置、离心得沉淀2。

(5)将沉淀1和沉淀2合并，用乙醇洗涤后，加水复溶，然后与树脂混合搅拌，再经抽滤、透析、冻干后，得所述的卵转铁蛋白。

2.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的将蛋清液稀释是指将蛋清液用水稀释；水的质量用量为蛋清液质量的1.5～3倍；最优选地，水的质量用量为蛋清液质量的2倍。

3.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(1)中的搅拌采用磁力搅拌；搅拌时间为50～70min；最优选地，骤(1)中的搅拌采用磁力搅拌；搅拌时间为60min。

4.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(1)中的离心是指在3～5℃下进行离心，离心转速为5500～6500r/min，离心时间为15～25min；最优选地，步骤(1)中的离心是指在4℃下进行离心，离心转速为6000r/min，离心时间为20min。

5.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(2)中FeCl₃·6H₂O、碳酸氢钠以及氯化钠的质量用量与蛋清液的质量用量比为3～3.5：2.1～2.6：5～6：200；最优选地，步骤(2)中FeCl₃·6H₂O、碳酸氢钠以及氯化钠的质量用量与蛋清液的质量用量比为3.24：2.52：5.256：200。

6.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(2)中搅拌采用磁力搅拌；搅拌时间为100～150min；最优选地，步骤(2)中搅拌采用磁力搅拌；搅拌时间为120min。

7.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(3)中的乙醇体积浓度达到43％。

8.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，步骤(4)中的乙醇体积浓度达到59％。

9.根据权利要求1所述的从鸽蛋中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，将步骤(5)得到的卵转铁蛋白进一步进行超滤，得到纯度更高的卵转铁蛋白；所述的超滤采用直径50mm，0.45μm的滤膜；超滤温度为25℃，压力为5psi。

10.权利要求1～9任一项所述的方法制备得到的卵转铁蛋白。