[发明专利]云杉花墨天牛特异性引物及快速分子检测方法有效
申请号: | 202010118264.2 | 申请日: | 2020-02-26 |
公开(公告)号: | CN111235283B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 宗世祥;石丰铭;陶静;焦继鹏;黄建东 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学;北京昌回林海生态科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京文苑专利代理有限公司 11516 | 代理人: | 王炜 |
地址: | 100083 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 云杉 天牛 特异性 引物 快速 分子 检测 方法 | ||
1.一种用于检测云杉花墨天牛引物对,其上游引物核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示,其下游引物核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。
2.一种用于检测云杉花墨天牛的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的引物对。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包含PCR缓冲液、dNTP、MgCl2、TaqDNA聚合酶和ddH2O。
4.一种利用权利要求1所述的引物对检测云杉花墨天牛的方法,其特征在于,提取待测物的基因组DNA作为模板,以权利要求1所述的引物对作为扩增引物,进行PCR扩增,对扩增产物进行检测,若出现394bp的DNA条带,则检测为云杉花墨天牛。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序为94℃预变性2分钟;94℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸30秒,共进行30个循环;最后72℃延伸2分钟,置于4℃下保存。
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