[发明专利]一种延长鱼卵受精孔开放时间的溶液和利用受精孔导入外源基因的方法有效
| 申请号： | 202010116099.7 | 申请日： | 2020-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN111304256B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 曹哲明;强俊;徐跑 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/88 | 分类号： | C12N15/88 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 吕纪涛 |
| 地址： | 214000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 延长 鱼卵 受精 开放 时间 溶液 利用 导入 基因 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用受精孔导入外源基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将延长鱼卵受精孔开放时间的溶液与阳离子脂质体Lipofecter、外源基因混合，得到混合溶液；
2)将所述步骤1)得到的混合溶液鱼卵混合后振荡10～30min；
步骤1)所述延长鱼卵受精孔开放时间的溶液以水为溶剂，每升包括氯化钠6g、氯化钾0.15g、氯化钙0.1g、碳酸氢钠0.1g、磷酸二氢钠0.1g和葡萄糖1g；
所述鱼卵包括罗非鱼鱼卵和/或鲤鱼鱼卵。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水为蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)延长鱼卵受精孔开放时间的溶液与阳离子脂质体Lipofecter的体积比为1:0.1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)混合溶液的体积与鱼卵的个数比为4ml:1000个。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)振荡的时间为20min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)振荡的速度为60转/min。
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