[发明专利]引物对及其应用以及特异性检测动物双歧杆菌的试剂盒和方法在审
| 申请号： | 202010111292.1 | 申请日： | 2020-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN111139308A | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 金君华;任培豪;张红星;谢远红;刘慧 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/06;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 乔雪微;刘依云 |
| 地址： | 102206 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 及其 应用 以及 特异性 检测 动物 杆菌 试剂盒 方法 | ||
1.一种引物对，其特征在于，该引物对包括SEQ ID NO:1所示的正向引物和SEQ ID NO:2所示的反向引物。
2.权利要求1所述的引物对在特异性检测动物双歧杆菌中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其中，所述动物双歧杆菌为动物双歧杆菌A12(Bifidobacterium animalis A12)，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.17308。
4.一种用于特异性检测动物双歧杆菌的试剂盒，所述试剂盒含有PCR扩增试剂和引物对，其特征在于，所述引物对为权利要求1所述的引物对。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还含有DNA提取试剂。
6.一种定性检测待测样本中动物双歧杆菌的方法，其特征在于，该方法包括：在能够进行PCR扩增的条件下，使用权利要求1所示的引物对对所述待测样品进行PCR扩增，获得PCR扩增产物，并对所述扩增产物进行电泳；
若出现目标条带，则判断所述待测样本中存在动物双歧杆菌，若未出现目标条带，则判断所述待测样本中不存在动物双歧杆菌。
7.一种定量检测待测样本中动物双歧杆菌的方法，其特征在于，该方法包括：在能够进行PCR扩增的条件下，使用权利要求1所示的引物对对所述待测样品进行实时定量PCR检测，进而获得所述待测样本中动物双歧杆菌的含量。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述检测待测样本中动物双歧杆菌的含量在105-1010CFU/g之间。
9.根据权利要求6或7所述的方法，其中，所述PCR扩增的条件包括：
先将PCR扩增体系在93-95℃下预变性2-5min；
然后在如下的程序下进行30-40次循环：
93-95℃变性25-35s，57-58.5℃退火8-12s，70-75℃延伸18-22s；
最后70-75℃延伸3-10min。
10.根据权利要求6或7所述的方法，其中，对所述待测样品进行PCR扩增的扩增体系包括：以20μL所述扩增体系计，待测样本的量为0.5-1.5μL，SEQ ID NO:1所示的正向引物的量为0.5-1.5μL，SEQ ID NO:2所示的反向引物的量为0.5-1.5μL，DNA聚合酶预混液的量为8-12μL。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京农学院，未经北京农学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010111292.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
