[发明专利]基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法有效
| 申请号： | 202010109698.6 | 申请日： | 2020-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN111004842B | 公开（公告）日： | 2022-08-16 |
| 发明（设计）人： | 黄志玲;黄种山;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 黄志清 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 362300 福建省泉州市南*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 rna 连接酶 jak2 基因 特定 突变 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变的检测试剂盒，其特征在于试剂盒包括：（1）sRPlaseI连接酶，sRPlaseI连接酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，对应的基因编码序列如SEQ ID NO：2所示；（2）sRPlaseI连接酶缓冲液，pH为7.5，由500mM Tris-Hcl、100mM Mg2+、10mM ATP和10mM DTT组成，每1μl反应体系中添加0.1μl的连接酶缓冲液；（3）RNase H酶及其配套的缓冲液，采用美国Thermo Fisher公司产品；（4）磁载多肽Ps，即包被多肽Ps的链霉亲和素磁珠，其中多肽Ps的氨基酸序列为N’-EAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGMANCEHL-C’，其N端氨基酸E已经经过生物素修饰；（5）短DNA片段P1，其序列为5’-ATAGATCTGTAAAGGAGAAAATA-3’；（6）短DNA片段P2，其序列为5’-GCAAAATTTACATAATAATTTTTTCAG-3’；（7）引物Pm，其序列为5’-ATGATCCAGAATGCTGGAAC-3’；和（8）引物Pn，其序列为5’-GTCTCAAAAAGCTGAGTTGAA-3’；所述JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变是以NCBI登录号为NG_009904.1的JAK2野生型基因作为参考序列的。
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