[发明专利]一种基于间接比色法检测NO的试剂盒及其制备使用方法

说明书

本发明提供了一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中，试剂R1包括缓冲液、无机盐、保护剂、表面活性剂、防腐剂，溶剂为纯化水；试剂R2包括缓冲液、无机盐、防腐剂，溶剂为纯化水。本发明还提供了一种基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备使用方法。本发明的优点在于：解决了现有市场上流通的检测NO的缺点，可以使用全自动生化分析仪检测NO，操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好，最重要的一点是还能提高试剂的灵敏度和稳定性。

技术领域

本发明涉及生物化学和试剂制备领域，尤其涉及一种基于间接比色法检测NO的试剂盒及其制备使用方法。

背景技术

一氧化氮(NO)是一种化学性质比较活泼的气体分子。在生理条件下，机体内NO浓度极低，是由一氧化氮合成酶(nitric oxide sythase，NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)，在NADPH和O₂的参与下形成的。NO在生物体内是一种双重作用的信使分子，作为第二信使和神经递质，同时是细胞间和细胞内信息传递的重要调节因子。NO具有独特的理化性质和生物学活性作用。在病理条件下，当NO的代谢失衡，就会导致心血管、呼吸、神经等系统的多种疾病。

研究表明，NO可能就是血管内皮舒张因子(endothelium-derived relaxingfator,EDRF)，其异常与临床多种疾病的发生及发展有关。NO具有扩张血管、调节血压、抑制白细胞黏附和血小板聚集和介导心肌细胞凋亡等作用，在心血管疾病的防治和干预治疗方面发挥了重要的作用。

以下为NO浓度在临床上的具体表现与意义：

(1)心、脑血管病

高血压病：高血压的发病及病情与血中NO水平有关，病情越重，NO降低越明显，两者呈显著负相关。

冠心病：NO在冠心病的发病及发展过程中起着重要作用，冠心病患者NO浓度显著低于对照组(P＜0.05)，而且，心绞痛发作与否，是否伴有高血压、高胆固醇血症，血清NO浓度差异均有显著性。

脑梗塞：脑梗塞患者发病24小时后NO水平与神经功能分呈显著正相关，与梗塞灶直径无显著相关性。

(2)肺病

慢性肺心病：NO反映肺心病心衰状况并与肺部的炎症有关。

慢性阻塞性肺疾病(COPD)：COPD急性发作期患者，血清NO浓度明显降低，随着病情好转而有所增加，但即使在缓解期，NO水平仍低于正常值，说明NO在COPD的发生和发展中起着重要作用。

(3)肾脏疾病

肾小球肾炎：急性肾小球肾炎好转的患者血清NO含量明显高于正常人，提示体内NO合成亢进；慢性肾小球肾炎好转的患者血清NO含量明显低于正常人，揭示内源性NO合成不足。说明NO在肾脏的致病作用具有双重性。

慢性肾功能衰竭：慢性肾功能衰竭患者不同病变时期和透析前后血清中NO含量的变化，发现尿毒症期(血清肌酐＞445umol/L)则明显升高；血液透析后NO浓度较透析前明显下降。

肾综合征出血热(HFRS)：通过检测NO在HFRS患者血清中的动态变化，发现HFRS患者从发热期至多尿期NO含量明显增加，提示NO在HFRS的血管内皮损伤和免疫活性物质分泌异常均起重要作用，对患者作NO的动态观察可作为判断病情的有效指标。

72例肾脏病患者的血清NO水平显著高于健康对照组，说明各种肾病的发生发展过程可能与NO的产生过多有关。

(4)肿瘤