[发明专利]一种基于间接比色法检测NO的试剂盒及其制备使用方法

权利要求书

1.一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

其溶剂为纯化水；

试剂R2：

缓冲液 0.6-15g/mL

无机盐 3-50g/mL

防腐剂 0.05％-0.5％

其溶剂为纯化水。

2.根据权利要求1所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述保护剂为乙二醇、三乙胺、丙三醇、三乙醇胺中的一种或多种；所述表面活性剂为曲拉通X-100、吐温-20、吐温-80中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括的成分及相应含量具体为：

其溶剂为纯化水。

4.根据权利要求1所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2包括的成分及相应含量具体为：

其溶剂为纯化水。

6.一种如权利要求1-5任一所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

(1)配制试剂R1：

按照试剂R1的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至5.35-5.45，制得试剂R1；

(2)配制试剂R2：

按照试剂R2的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至6.75-6.85，制得试剂R2。

7.一种如权利要求1-5任一所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

(1)吸取10μL样本，加入240μL试剂R1，37℃孵育5min；

(2)加入80μL试剂R2，置37℃孵育；

(3)孵育1min后读取吸光值A1；孵育5min后读取吸光值A2；按照ΔA＝A2-A1来计算ΔA，根据ΔA测算样本中NO含量。

8.根据权利要求7所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述基于间接比色法检测NO的试剂盒用于细胞裂解液、细胞培养液、组织裂解液、血清、血浆、尿液中NO含量的测定。