[发明专利]一种结核分枝杆菌复合群快速检测试剂盒及制备方法在审
| 申请号： | 202010104800.3 | 申请日： | 2020-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN111269996A | 公开（公告）日： | 2020-06-12 |
| 发明（设计）人： | 应斌武;柯博文;王睿敏 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院;成都华西精准医学产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/32 |
| 代理公司： | 成都时誉知识产权代理事务所(普通合伙) 51250 | 代理人： | 李双 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 结核 分枝杆菌 复合 快速 检测 试剂盒 制备 方法 | ||
1.一种结核分枝杆菌复合群快速检测试剂盒，其特征在于：包括鉴别试剂，所述的鉴别试剂包括引物对与探针，所述的引物对包括十对引物对中的至少一对，所述的探针包括十个探针中的至少一个；所述的十对引物对为：第一对：上游引物IS6110-F1、下游引物IS6110-R1；第二对：上游引物IS6110-F2、下游引物IS6110-F2；第三对：上游引物IS6110-F3、下游引物IS6110-F3；第四对：上游引物IS6110-F4、下游引物IS6110-R4；第五对：上游引物IS6110-F5、下游引物IS6110-F5；第六对：上游引物IS6110-R6、下游引物IS6110-R6；第七对：上游引物IS6110-R7、下游引物IS6110-R7；第八对：上游引物IS6110-R8、下游引物IS6110-R8；第九对：上游引物IS6110-R9、下游引物IS6110-R9；第十对：上游引物IS6110-R10和下游引物IS6110-R10；所述的各引物的编号依次为SEQ ID NO.1～20，并且其核苷酸序列如下表1所示，所述探针选取与靶核苷酸序列互补的5’端单链靶核酸序列结合部位或/和与所述靶核酸序列互补的3’端单链靶核酸序列结合部位的区域；所述的十条探针分别为第一条探针IS6110-P1、第二条探针IS6110-P2、第三条探针IS6110-P3、第四条探针IS6110-P4、第五条探针IS6110-P5、第六条探针IS6110-P6、第七条探针IS6110-P7、第八条探针IS6110-P8、第九条探针IS6110-P9和第十条探针IS6110-P10，所述各个探针的寡核苷酸序列分别如下表1所示，并且其序列编号依次为SEQ ID NO.21～30；
表1 各个探针与引物
序列编号 序列名称 寡核苷酸序列(5’—3’) SEQ ID NO.1 IS6110-F1 CGATCGAGCAAGCCATCTG SEQ ID NO.2 IS6110-R1 CCGTATGGTGGATAACGTCTTTC SEQ ID NO.3 IS6110-F2 CGGCCTATACAAGACCGAGC SEQ ID NO.4 IS6110-R2 GTCTCTGGCGTTGAGCGTAG SEQ ID NO.5 IS6110-F3 GCACATCAGCCGCGTCCAC SEQ ID NO.6 IS6110-R3 CCTCGATGCCCTCACGGTT SEQ ID NO.7 IS6110-F4 ATACAAGACCGAGCTGATCAAACC SEQ ID NO.8 IS6110-R4 GCGCGGTGGCCAACT SEQ ID NO.9 IS6110-F5 GCACATCAGCCGCGTCCAC SEQ ID NO.10 IS6110-R5 TCTTTCAGGTCGAGTACGCCTT SEQ ID NO.11 IS6110-F6 ACTACGGTGTTTACGGTGCC SEQ ID NO.12 IS6110-R6 AGGCCGAGTTTGGTCATCAG SEQ ID NO.13 IS6110-F7 GAGCACATCAGCCGCGTCCAC SEQ ID NO.14 IS6110-R7 CCGAGTTTGGTCATCAGCCGTTC SEQ ID NO.15 IS6110-F8 GGTCGGAAGCTCCTATGACAAT SEQ ID NO.16 IS6110-R8 GGTTTGATCAGCTCGGTCTTG SEQ ID NO.17 IS6110-F9 CGCCCCATCGACCTACTACGAC SEQ ID NO.18 IS6110-R9 ATGTGCTCCTTGAGTTCGCCAT SEQ ID NO.19 IS6110-F10 ATCGAGCAAGCCATCTGGAC SEQ ID NO.20 IS6110-R10 TTGATCGTCTCGGCTAGTGC SEQ ID NO.21 IS6110-P1 FAM-CCCGCCAACAAGAAGGCGTACTCG-BHQ1 SEQ ID NO.22 IS6110-P2 FAM-TGATCAAACCCGGCAAGCCCTG-BHQ1 SEQ ID NO.23 IS6110-P3 FAM-ACGGTGTTTACGGTGCCCGCAAAG-BHQ1 SEQ ID NO.24 IS6110-P4 FAM-CGCCGCCAACTACGGTGTTTACGG-BHQ1 SEQ ID NO.25 IS6110-P5 FAM-CAAGCCCTGGCGGTCCATCG-BHQ1 SEQ ID NO.26 IS6110-P6 FAM-GACCACATCAACCGGGAGCCCAGC-BHQ1 SEQ ID NO.27 IS6110-P7 FAM-CTAACCCTGAACCGTGAGG-BHQ1 SEQ ID NO.28 IS6110-P8 FAM-ACGCCGCCAACTACGGTGTTTACG-BHQ1 SEQ ID NO.29 IS6110-P9 FAM-CACTAGCCGAGACGATCAACGGCC-BHQ1 SEQ ID NO.30 IS6110-P10 FAM-CCTGAAAGACGTTATCC-BHQ1
其中，各个探针及引物的寡核苷酸序列中，FAM为5’端标记的FAM荧光基团，BHQ1为3’端标记的BHQ1淬灭基团，F为上游引物，R为下游引物，P为探针。
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