[发明专利]一种卵形鲳鲹性别特异性分子标记引物、试剂盒及其应用有效
| 申请号: | 202010099694.4 | 申请日: | 2020-02-18 |
| 公开(公告)号: | CN111206082B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
| 发明(设计)人: | 郭梁;张殿昌;杨静文;刘宝锁;郭华阳;朱克诚;张楠;杨权 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6879 | 分类号: | C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华;刘艳丽 |
| 地址: | 510300 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 卵形 性别 特异性 分子 标记 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种卵形鲳鲹性别特异性分子标记引物,其特征是:所述引物为引物P1,所述引物P1包括正向引物P1-F和反向引物P1-R,所述正向引物P1-F的碱基序列如SEQ ID NO :1所示,所述反向引物P1-R的碱基序列如SEQ ID NO :2所示。
2.一种用于卵形鲳鲹性别鉴定的试剂盒,其特征是:所述试剂盒包括权利要求1中的引物。
3.一种卵形鲳鲹性别鉴定方法,其特征是:采用PCR扩增在雌雄个体的基因组DNA中扩增出特异性片段,具体包括:合成权利要求1中的引物,提取待测卵形鲳鲹的基因组DNA,采用权利要求1中的引物,以基因组DNA为模板,进行PCR扩增,采用毛细管凝胶电泳法检测扩增产物,根据电泳结果鉴定雌雄个体,其中杂合峰型为雌性个体,纯合峰型为雄性个体。
4.根据权利要求3所述的卵形鲳鲹性别鉴定方法,其特征是:PCR扩增时采用的PCR反应体系为:20ng/μL DNA模板1.0μL,10×Taq buffer Mg2+ free 2.5μL,浓度2.5mMdNTP 2.0μL,浓度25mM MgCl2 1.5 μL,10mM 正向引物和反向引物各0.5μL,5 U/μL Taq 0.1μL,ddH2O补齐25 .0μL。
5.根据权利要求3所述的卵形鲳鲹性别鉴定方法,其特征是:PCR扩增时采用的PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性10 sec,55℃退火40 sec,72℃延伸45 sec,循环35次,72℃延伸10 min。
6.权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒在鉴定卵形鲳鲹性别方面的应用。
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