[发明专利]一种BCMA结合蛋白及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种BCMA结合蛋白及其制备方法和应用。所述BCMA结合蛋白包括重链可变区和轻链可变区，所述的轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述的重链可变区包含HCDR1、HCDR2和HCDR3。所述LCDR1、LCDR2和LCDR3以及所述HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列详见本发明。本发明的BCMA结合蛋白具有良好特异性亲合力，其在肿瘤细胞系上比对照抗体结合更好，且其内化效应优于对照，因此可以作为ADC候选物进一步开发。经ELISA试验，抗体都有部分阻断功能，在作为mAbs或CAR‑T治疗时可能获得额外的疗效。

技术领域

本发明属于生物大分子领域，具体涉及一种BCMA结合蛋白及其制备方法和应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(MM)一直以骨髓来源的浆细胞增殖失控为特征，伴有异常分泌的免疫球蛋白或游离轻链，在最常见的血液系统恶性肿瘤中居第二位，约占所有血液肿瘤的10％。在美国，每年新诊断的患者超过30000人，死亡人数超过12000人。尽管有了蛋白酶抑制剂(Bortezomb)等新的靶向疗法，但人们普遍认为它是无法治愈的，因此需要在药物开发方面做出更多的努力。

B细胞成熟抗原(BCMA)，又称TNFRSF17或CD269，是一种仅在B细胞谱系，尤其是末端分化的B细胞中表达的特异性抗原。它通常不存在于初始和记忆B细胞，并在多发性骨髓瘤细胞上高度表达。BCMA与其配体BAFF和APRIL相互作用时，可通过 NF-kB和JNK通路的信号转导，诱导B细胞成熟、增殖和存活。作为一种I型跨膜蛋白，在体液免疫中起着重要的作用，是抗体衍生免疫治疗的理想靶点。

然而现有技术中的抗BCMA的抗体存在内化作用弱以及与293T-huBCMA细胞结合弱等缺陷，因此亟需一种抗BCMA的抗体其既具有足以成药的亲和力又具有优异的内化作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为克服现有技术中存在的已有抗BCMA的抗体内化作用弱以及与293T-huBCMA细胞结合弱等缺陷，提供一种BCMA结合蛋白及其制备方法和应用。

为解决以上技术问题，本发明提供一种BCMA结合蛋白，其包括重链可变区(VH) 和轻链可变区(VL)，所述的轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述的LCDR1 的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示或为其变体，所述的LCDR2的氨基酸序列如序列表中SEQ IDNO:2所示或为其变体，所述的LCDR3的氨基酸序列如序列表中 SEQ ID NO:3所示或为其变体；所述的重链可变区包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述的HCDR1的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:4所示或为其变体，所述的HCDR2 的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:5所示或为其变体，所述的HCDR3的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示或为其变体。其中，所述变体为分别在SEQ ID NO:1～6所示的氨基酸序列的基础上发生3、2或者1个突变后获得的氨基酸序列。

在类似“具有3、2或1个氨基酸突变”中“氨基酸突变”是指相较于原氨基酸序列而言，变体的序列存在氨基酸的突变，包括在原氨基酸序列的基础上发生氨基酸的插入、缺失或替换。示例性的解释是对CDR的突变可以包含3个、2个或1个氨基酸的突变，这些CDR之间可以任选地选择相同或不同数目的氨基酸残基进行突变，例如可以是对 CDR1进行1个氨基酸的突变，对CDR2和CDR3不进行氨基酸突变。

本发明中所述的突变可以包括目前如本领域技术人员公知的突变，例如在抗体的生产或者应用过程中，可能会对抗体进行的一些突变，例如对可能存在的，特别是CDR区的转录后修饰(Potential post-translational modifications，PTMs)的位点进行突变，包括抗体的聚集、脱酰胺基敏感(asparagine deamidation，位点(NG、NS和/或NH等)、天冬氨酸异构(DG、DP)敏感位点、N糖基化(N-{P}S/T)敏感位点及氧化敏感位点等相关突变。